-
[size=2][font=Verdana]各位大侠我是一个新手,才做PCR不久,遇到不少问题,
⑴Tm=4(G+C)+2(A+T),这G\C\A\T是分别代表它们的数量吗?
⑵如果设计上下游两条引物,但两个Tm值相差很大,一个
2015年11月11日发布人:PCR
-
[size=2]引物退火温度50-60度,taq酶延伸温度72度,那么taq酶延伸的时候部分引物岂不是已经熔开?我也做过一些pcr,但没有想过这个问题,请各位高人帮忙解答。
我看到有人说引物Tm值不要超过72度,这是为什么呢,我觉得
2014年09月25日发布人:四福晋
-
[size=3][b] 第一节:概述[/b][/size]
[size=3] 1、 红外吸收光谱与紫外吸收光谱一样是一种分子吸收光谱。红外光的能量(△E=0.05-1.0ev)较紫外光(△E=1-20ev)低,当红外光照射分子时不足以引起分子中价电子能级的跃迁,而能引起分子振动能级和转动能级
2017年01月26日发布人:iTIANMING
-
[size=2]请问各位大虾PCR时TM是看TM(1M Na+)还是TM(0.05M Na+)?P时是不是将其降5-8度?目的基因P不出来只有二聚体出来,是不是引物没设计的好的原因?我该怎么办啊?[/size],[size=2]我也发现
2016年02月09日发布人:bongte
-
[size=2]请问大家 引物的Tm值和退火温度之间有什么关系 如何选择引物的退火温度啊[/size],[size=2]
退火温度一般是引物的Tm值减去5[/size],[size=2]Tm值减去3-5度[/size],[size=2
2014年09月01日发布人:sistis
-
TM应该相差不要超过2度,你这可以试一试拿59度那个引物降低2-5度扩增 [/quote]
[size=2]试过了,普通PCR时P不出来的![/size],[quote]原帖由 [i]fox_79[/i] 于 2015-4-28 09
2015年04月28日发布人:fox_79
-
SYBR Green I后还是在此机器上(其他条件都相同),却出现了一条200bp的杂带,已排除污染的可能,我想请教各位高手,是否SYBR Green I 会降底引物的Tm值,使它产生错配,或还有其他原因,有否介绍SYBR Green I的
2011年09月15日发布人:缘yuan
-
[size=2]偶用sybr green I 作real time pcr, 提细胞株的RNA经PROMEGA 的反转录合成cDNA,然后用SYBR GREEN I 在ABI 7000机子上作-Real time pcr。在上机前偶用普通
2015年12月04日发布人:伊莎贝拉
-
[size=2][b]荧光定量PCR溶解曲线Tm跨度宽是怎么回事,谢谢大家[/b][/size],[size=3]
染料法?[/size],[quote]原帖由 [i]feima+[/i] 于 2014-11-29 14:30 发表
2014年11月29日发布人:misswu61
-
[size=2]请教各位师兄师姐:如果一个引物对的两条引物的Tm值不一样,pcr中的Tm值应该参照那个呢?是比较高的还是比较低的?多谢![/size],[quote]原帖由 [i]fei1226com[/i] 于 2015-4-1 16
2015年04月01日发布人:fei1226com