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[size=2]请问各位大虾PCR时TM是看TM(1M Na+)还是TM(0.05M Na+)?P时是不是将其降5-8度?目的基因P不出来只有二聚体出来,是不是引物没设计的好的原因?我该怎么办啊?[/size],[size=2]我也发现
2016年02月09日发布人:bongte
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74.8一个63.7该怎么选择退火温度,还有要批的东西在1600bp以上,延伸时间该有多长啊[/font][/size],[size=2]
通常以连续与模板互补的碱基个数用以下公式计算:
Tm=(A+T)X2+(G+C)X4
然后再减5度
2015年11月11日发布人:PCR
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[size=2]引物退火温度50-60度,taq酶延伸温度72度,那么taq酶延伸的时候部分引物岂不是已经熔开?我也做过一些pcr,但没有想过这个问题,请各位高人帮忙解答。
我看到有人说引物Tm值不要超过72度,这是为什么呢,我觉得
2014年09月25日发布人:四福晋
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[size=2]本人3’端已经测出来了,现在做5‘端,却怎么也扩不出来。5'RACE做了两轮pcr,用的都是以下程序:即1、94度2分钟。2、94度30秒,72度3分钟,5cycle。3、94度 30秒,70度30秒,72度3min,5
2015年08月05日发布人:月牙牙
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[size=2]请问大家 引物的Tm值和退火温度之间有什么关系 如何选择引物的退火温度啊[/size],[size=2]
退火温度一般是引物的Tm值减去5[/size],[size=2]Tm值减去3-5度[/size],[size=2
2014年09月01日发布人:sistis
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[size=3][font=仿宋_GB2312][求助]小规格制剂的回收率怎么做?
请教各位大虾:
郁闷!
偶最近做一个片剂,规格100ug/片,片重100mg,辅料量是原料1000倍!分析方法为HPLC,做回收率试验时,若
2011年11月17日发布人:周伯通pp
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[size=2]单位准备购置液质,预算200万,油品/食品分析,定量用。[/size],[size=2]W的,T的,A的都行吧[/size],[size=2]200W如果不追加,大部分会买AGILENT的6460,AB的4000要追加
2016年03月22日发布人:yhn
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[/color][/size],[size=4]我刚做过5’、3‘ RACE,我个人的经验如下:
1、首先,提的RNA必须完整,最好跑个RNA电泳来验证一下;
2、设计引物时要注意:Tm最好大于70度,两引物间要有100-200bp的重叠区
2011年09月27日发布人:幽兰君
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TM应该相差不要超过2度,你这可以试一试拿59度那个引物降低2-5度扩增 [/quote]
[size=2]试过了,普通PCR时P不出来的![/size],[quote]原帖由 [i]fox_79[/i] 于 2015-4-28 09
2015年04月28日发布人:fox_79
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[size=2]各位高人:
小弟不才,刚学催化实验不久,选择了一个反应物小试牛刀,结果文献上标注要达到200度的高温,我这是将小型反应釜放在油浴锅中升温达到,
可是甲基硅油有问题,刚开始用其他人用过的硅油,结果
2016年01月15日发布人:kulee