-
[size=2][color=Black]
我是第一次做荧光免疫组化,结果不理想,希望各位老师能帮我分析分析.
首先介绍一下我的操作步骤:用甲醛溶液固定细胞后,放在4度冰箱备用.
1.取出细胞爬片在室温下解冻,PBS冲洗3遍*3
2012年07月30日发布人:KGZ564
-
[size=2][color=Black][b]
Hif1a的WB好象特别难做,我试了几次,组织中的核蛋白的Hif1a怎么也在120KD测不出来,谁做过Hif1a的WB啊,能做出来吗[/b][/color][/size],[quote
2013年05月17日发布人:zhihui小新
-
[size=2][color=Black][b]
各位高手,我刚开始做WB,我的分子量是97KD,120V恒压转膜转2个小时45分钟,转完膜后立春红染色有条带,用5%脱脂奶粉(TBST稀释)室温封闭两小时,用碧云天的一抗稀释液稀释一抗
2013年07月26日发布人:jingling845
-
=Black]沉淀后的检测实验是怎么设计的?[/color][/size],[size=2][color=Black]
沉淀后的上清取出,跑电泳,珠子用RIPA裂解液洗两次后加入适量裂解液及Loadingbuffer,95度煮5min,然后
2013年11月08日发布人:wzqzy
-
[size=3][color=Black][font=仿宋_GB2312]请教各位蛋白版高手,我最近准备做一个分子量为600多KD的大蛋白的WB实验,因该分子较大,内参选择、MARKER、转膜条件出现疑问。
因为平时大家常用的主要
2014年12月26日发布人:Ao7
-
[size=2][color=Black][font=黑体]
有关免疫沉淀的几个问题,请高手帮忙解决:
1.如何确定IP时,抗原、抗体以及AGAROSE的最适比例。有人说是用琼脂糖扩散法,如何操作?
2.IP时,离心rpm和时间应是
2013年12月23日发布人:89tongzijun
-
[color=Black][size=2]我准备做WB提了好多蛋白,当时没做蛋白定量。现在定量OD值多在0.6左右,请问有什么浓缩的办法使蛋白浓度增高?急!万分感谢![/size][/color],[size=2][color=Black
2014年05月29日发布人:大尾巴
-
[size=2][color=Black]
我做wb的时候,条带出来过两次,现在连续三次做不出来了,跑胶跟转膜应该没有问题的,我用丽春红染色膜上的蛋白条带是有的,跟前几天做出来用的一抗,二抗,发光剂是一样的.一抗跟二抗的浓度也是一样的
2014年04月05日发布人:jkobn
-
[size=2][color=Black]
各位高手,我刚开始做WB,我的分子量是97KD,120V恒压转膜转2个小时45分钟,转完膜后立春红染色有条带,用5%脱脂奶粉(TBST稀释)室温封闭两小时,用碧云天的一抗稀释液稀释一抗孵育过夜
2013年11月15日发布人:花想容
-
[size=2][color=Black]
回首做WB已经有小半年了,成功的经验不敢谈,但失败的经验却积累了很多。其中的酸甜苦辣只有自己知道。
我用一个细胞天然表达的蛋白来检测制备的单抗,可细胞里这个蛋白是很少量的,微乎其微,而且
2014年03月07日发布人:DDD