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内参是42kd ,一抗(兔来源)是4℃过夜后用TBST洗膜3×10分钟 ,二抗是羊抗兔 RT 1小时,TBST洗膜3×10分钟, 显影定影液是买过来的粉剂 自己按照说明溶解就可以的,显影3分到5分钟,定影一般是5分钟,压片一般是10分到半
2014年02月22日发布人:奇蒙kate
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[size=2][color=Black]
实验过程:
1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1:10,000开始,5倍稀释。
点1ul到NC膜上,点完后迅速泡到PBS里。
2. 配好发光底物后取出膜,将SuperSignal
2013年11月09日发布人:jude
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,primary antibody: 将膜剪开分别杂交,室温6小时。
目的蛋白17kd,一抗兔来源,实验室以前有人用过这个抗体,质量很好。1:5000稀释
内对照b-tubulin,也是兔来源的。1:5000稀释
6,TBST洗3次
2014年05月10日发布人:youreyes
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想将氧化石墨烯的羧基和另一物质的伯胺反应,在水相EDC和NHS催化条件下,其中EDC和NHS是配在PBS(pH=7.4)缓冲里,但是发现氧化石墨烯水溶液和EDC/NHS混合后出现絮状沉淀,难以进行之后的实验,请问怎样能克服出现沉淀这个问题,为什么会沉淀?,我想问,你怎么确定酰胺键是否反应上去了?
2014年02月05日发布人:nmn
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[size=2][color=Black]实验过程:
1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1:10,000开始,5倍稀释。
点1ul到NC膜上,点完后迅速泡到PBS里。
2. 配好发光底物后取出膜,将SuperSignal
2013年07月10日发布人:ukonptp
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8. 一抗(兔多克隆抗体1:100) 四度过夜(阴性对照用PBS )
9.PBS 洗3次,每次5min
10.加二抗(1:1000) 1h 室温
11.PBS 洗4次,每次5min
因为一抗干了,所以我重新加了一抗,在37度孵育30min
结果就是这样的图片,很不理想,
2012年07月24日发布人:finger
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[size=2][color=Black][b]
请问细胞的F-actin免疫荧光染色可不可这样做:
一抗用Actin 兔多克隆抗体
二抗用FITC标记羊抗鼠IgG抗体
这个问题较急,请大侠解答,谢谢[/b][/color
2012年08月02日发布人:研究僧112
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[size=2][color=Black]
【原创】兔气管纤毛上皮细胞(原代培养):
1.细胞种类:纤毛上皮细胞
2.培养的天数:7天;
3.放大倍速:倒置显微镜 X200;
4.培养基种类:DMEM+10%小牛血清
2012年02月18日发布人:bamboo16
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建议最好用乳鼠或乳兔来做,细胞生长性好些。当然分离的难度也要大些了。
另外,还可以加入内皮细胞生长因子VEGF,血清也最好用进口的胎牛(20%FBS)。
永生化的细胞株目前还有一定的争论,有的杂志不接受这样的稿件。[/color
2012年10月29日发布人:49888
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][/color][/size],[size=2][color=Black]55kd的带是重链,小鼠的组织样品里面含有很多的IgG,就会和鼠的二抗反应,最好用兔抗的actin来检测,或者从50kd左右剪开膜,只压下面的43kd的actin。[/color][/size],[size=2][color=Black]
2023年08月18日发布人:二子