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(1)定义:正(反)相色谱法是流动相极性小(大)于固定相极性的液相色谱法。(2)固定相:正相色谱法使用极性固定相,如氰基、氨基键合相;反相色谱法使用非极性固定相,如C18、C8、苯基、二醇基键合相,或使用极性大的流动相,使用氰基、氨基键合
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一、反相色谱柱评价条件
对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测
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高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱前提条件是使用的反相色谱柱(C8、C18及其衍生等),不知道你用的什么柱子1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍(推荐值)柱体积,应考虑柱前仪器的死体积(约5-10ml),可以不接柱子大流
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宽广(相对比反相而言),各类极性的大小分子,天然产物,都可以在反相体系中得到有效分离。3、流动相不同:正相色谱,因为硅胶表面的硅羟基极性大,极性大的水溶性化合物很难被洗脱下来,只有使用更强极性的溶剂才能成功。在反相色谱中,因为极性化合物和固定相的吸附性较小,因此用较小极性的溶剂,就可以实现比较理想的洗脱效果。
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1.硅胶基质反相色谱固定相反相高效液相色谱中使用的固定相大多是各种烃基硅烷的化学键合硅胶。烷基链长可以是C2、C4、C6、C8、C16、C18和C2等,最常用的是C18(又称ODS),即十八烷基硅烷键合硅胶。键合烷基的链长对键合相的样品
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化合物。RPC在现代液相色谱中应用zui为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。 随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相
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正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体
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1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是 ODS 柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等最好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径
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反相液相色谱柱是根据溶质、极性活动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱形式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在液相色谱中这是运用面较广的一种别离形式,在生物大分子的反相液相色谱条件下
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此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。反相(C8,C18,ODS,RP-8和RP-18)通常用于反相条件(水相)。极性胶联型(APS,diol,CN和NH2)依照应用目的,可以用于正相和