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测定,只有转化率测定。
转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
建议用G418筛选,挑取单克隆,扩大培养得到转染质粒的稳定细胞系[/size
2012年05月29日发布人:8princess8
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培养液还是就用100微升,那加多少呢?
再就是细胞的问题,我养的是HEC-1A细胞,成簇生长的,很难吹散,这样是不是影响转染效果啊,我转了好几次都没转进去,有没有转过这个细胞的前辈啊,指教一下呗,融合度是多少为好啊[/b][/color
2012年04月12日发布人:2541
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刚刚接触细胞转染,转染的是HepG2细胞,用的是威格拉斯的vigofect转染试剂盒,试了好几次了,没有一次成功过.很是郁闷!
我转染的是9.6KB大小带有EGFP的质粒,同样用威
2012年07月03日发布人:bgf5
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我买了一个lipofectamine 2000转染试剂,看说明书称让细胞融合到90%-95%才转染,2-3天再分析表达,我想,到融合到90%以上才转,那转染以后,细胞
2012年11月06日发布人:Ao7
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做另外一个质粒试试你的转染是不是没有问题。
如果转染体系没有问题还是这样的话,那你的质粒的设计是不是合理?[/color][/size],[size=2][color=Black]
呵呵,不知楼主你转染的是什么细胞,但就我的经验,GFP表达
2019年11月08日发布人:bananapeople
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[size=2]请问哪位前辈做过逆转录病毒的包装及转染悬浮细胞的实验,有无宝贵的经验可以谈一下或者参考资料分享,多谢多谢![/size],[size=2]
你是说病毒和细胞悬液混合加入么?[/size],[size=2]
我做过
2014年12月04日发布人:is2011
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请教下各位,可以用正常细胞进行转染操作吗?如果可以的话,正常细胞是不是较易死亡?这样进行转染的话成功率是不是很小?谢谢大家。[/b][/color][/size],[size=2
2012年04月24日发布人:idea2011
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我想瞬时转染293T细胞,做WESTERN,不知道lipofectamine2000效率高,还是Ca(PO4)3转的高?
有哪位大侠有经验?谢谢[/b][/color][/size
2023年02月23日发布人:vcve
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[size=2][b]小弟准备作一个多质粒共转染(瞬时)加受试物测试荧光素检测,因为没做过,都是看文献看的,文献上的说法也不一致,有几个问题想问问大家:
1、瞬转细胞到底是在培养板里作好还是在培养皿里作好?如果用6cm的dish作,转好
2012年10月23日发布人:dragonkilly
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LIPOFECTAMINE 2000应该是比较公认的好的转染试剂,周围很多人都在用。我是第一次用。
当然,在用之前,我就咨询了实验室里的师兄师姐和师妹。综合前人的经验如下:
1. 细胞铺板后24小时左右开始转染
2015年08月10日发布人:逗号是句号