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新手做qRT-PCR,迂到困难,请各位战友不吝赐教,不胜感谢!
质粒转染细胞后提取总RNA,反转录得到cDNA做模板,SYBR green法定量PCR,但发现内参(beta-actin)的Ct值高于目的基因的Ct。即
2023年02月24日发布人:woshi
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最近在做一个结肠靶向的微丸,在做释放时,选用了三种释放介质,ph=1.0、6.8、7、4。文献中ph=1.0的盐酸介质基本上都是做2h,但是6.8的就差别很大,有的做2h,长的有做到6h的,有点疑惑,到底怎样定6.8中的溶出时间呢
2014年06月12日发布人:红旗渠
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[color=Black][size=5][font=仿宋_GB2312][b]求助:怎样查基因序列 [转自 丁香园论坛]
我是刚开始做pcr,最基本的都不懂,哪位能告诉我怎样查基因序列?如孕激素受体基因?盼望答复 [/b
2011年08月23日发布人:蓝蜗牛
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[size=2]由于实验需要,最近刚刚开始做real-time PCR,以前从没接触过,真是摸着石头过河!好在有咱们DXY,在这里学习到了很多,先要谢谢大家!
我是用SYBR GREEN I对不同样本中的目的基因进行相对定量,使用的机器
2016年03月03日发布人:langlang
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我是个新手,过些天要做RT-PCR,我把关于原理和方法的理论知识学习了一下,有一些了解了。但是不会设计引物,我只知道先要在NCBI上查到目的基因,然后用引物设计软件设计,也可以在线设计,但是我还是不知道具体该怎么做
2015年11月10日发布人:mimili_901
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[size=2]今天在应助以为战友的问题时觉得有必要把自己在人类基因缺陷疾病基因诊断过程中积累的经验跟大家分享和交流。撰写此贴,以便大家互相学习、讨论。
就以白仁战友应助的CCR9基因为例。
(一)如何寻找基因信息
首先,打开
2015年08月31日发布人:园丁##
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转染带有目的基因的EGFP-N1载体后,观察不到荧光,转染应该没问题。质粒浓度纯度都符合要求,且测序正确,无移码突变。不知道问题出现在什么地方,我于转染24,48小时后观察
2019年11月08日发布人:bananapeople
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大大提高了研究人员敲除研究基因或改变它们表达的能力。这一研究成果在线发布在4月8日的《自然—生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上。
TALENs是一种可靶向特异DNA序列的酶,由于具有一些比锌指核酸酶(ZFNs
2012年04月18日发布人:sd71469190
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设计引物时要求在基因保守区内设计,保守区是指什么?是基因的蛋白翻译区还是转录区呢?请高手指点下,谢谢!![/size],[size=2]我们所理解的保守区就是指mRNA外显子上的编码序列,也就是你说的蛋白翻译区
2015年10月09日发布人:jujuba
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[color=DarkSlateBlue][size=5][font=楷体_GB2312][b]real-time PCR引物设计— LOX-1基因五对引物全部失败,请求高手指点~[转自 丁香园论坛]
我打算做实时定量PCR
2011年08月15日发布人:竹蜻蜓