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【方法二】1、(用IDT工具)设计sgRNA,使其Spacer与DNA靶序列互补,提交给IDT定制合成sgRNA;2、将sgRNA与Cas9蛋白混匀,形成RNP;3、将RNP通过电转染等导入细胞或细胞核;4、通过sgRNA的Spacer
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本法检查药物的杂质。2.灵敏度法系指在供试品溶液中加入试剂,在一定反应条件下,观察有无阳性反应出现,以不出现阳性反应为合格,即以检测条件下的灵敏度来控制杂质限量。本法的特点是不需要对照物质。如纯化水中的氯化物检查,是在50ml纯化水中加入硝酸
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Cas12a:一种比Cas9更精确的酶
Cas9和Cas12a都依赖于20个核苷酸的gRNA来识别靶DNA,在几个重要方面有所差异,这对研究和治疗具有重要意义。
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首先,在其天然形式中,DNA切割
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基本原理:CRISPR簇是一个广泛存在于细菌和古生菌基因组中的特殊DNA重复序列家族,其序列由一个前导区(Leader)、多个短而高度保守的重复序列区(Repeat)和多个间隔区(Spacer)组成。前导区一般位于CRISPR簇上游,是富含AT长度为300~500bp的区域,被认为可能是CRISPR
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药物中的杂质主要有两个来源,即药物生产过程中引入和药品贮藏过程中产生的。1.生产过程中引入的杂质生产过程中引入的杂质主要来源于以下几个方面:①所用原料不纯;②部分原料反应不完全;③反应中间产物或副产物在精制时未能完全除去;④生产过程
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西妥昔单抗(抗EGFR)是表皮生长因子受体(EGFR)的抑制剂。 艾美捷西妥昔单抗Cetuximab品名:西妥昔单抗,抑制剂完整名称:西妥昔单抗(抗EGFR)同义词名称:C225 C225仅供研究使用。不用于诊断程序。 艾美捷西妥昔单抗Cetuximab化学性质:纯度:98.00%形式:固体粉溶解性:
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照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品20粒,精密称定,倾出内容物,混均,研细,精密称取适量(约相当于美洛昔康7.5mg),置100ml量瓶中,加0.1mol/L氢氧化钠溶液约70ml,超声使美洛昔康溶解,放冷,用
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Cas9核酸酶及其免疫原性S.pyogenes
ca 9(Spcas
9)是第一个CRISPR相关核酸酶(Cas),用于在特定DNA序列中引入双链断裂。由于靶点易适应性和显着效率,已经成为研究领域和潜在的临床治疗方法中最广泛使用的
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9102 药品杂质分析指导原则 本原则用于指导化学合成的原料药及其制剂的杂质分析,并供药品研究、生产、质量标准起草和修订参考。本原则不涵盖生物/生物技术制品、肽、寡聚核苷酸、放射性药品、发酵产品与其半合成产品、中药和来源于动植物的粗制品
2022-03-25
来源: 2020年版中国药典
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、电泳电压及时间的选择,今天我们就开始学习CRISPR/Cas9完全性基因敲除鼠的鉴定。 两条引物进行基因型鉴定 引物设计将引物设计在敲除区域的两端,即F1和R1引物,通过条带大小判断基因型。 预期片段大小条带1的大小为:F1/R1扩增的