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[size=2][color=Black][i]最近在做小分子17KD蛋白,电泳和转膜后未见明显小分子蛋白,附上转膜后立春红染色图片一张,图中17kd到10kd相应位置的蛋白少,似弥散,模糊不明。考染后蛋白分布也是这样(未附图)。请大家
2013年07月06日发布人:sunshine039
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[size=2][color=Black]请教大家
western转膜之后,封闭之前要不要洗膜?还是转完之后直接放在封闭液里?这样的话转移缓冲液中的甲醇会不会有影响?
再有,封闭之后,上一抗之前要不要洗?
谢谢大家![/color
2014年01月19日发布人:摆渡客
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],[size=2][color=Black]
染胶我没试过,但染膜绝对没问题![/color][/size],[size=2][color=Black]
我用的是第一种方案,染膜1-5分钟就行,另外你要注意一下膜的正反面,正面往往比反面明显的多
2014年04月16日发布人:junjie05
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问各位大侠一个问题:
膜样品方便做热重分析吗?是不是需要把膜进行粉碎?
还有样品需要准备多少克呢? 谢谢啦~~呵呵
顺便能告诉我一般要一个样多少钱,就更好了~~~~,对的,一般都需要先制成粉末,现在的热分析仪一般把热重和差热一起做
2016年01月09日发布人:灵魂
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[size=2][color=Black][font=黑体]
现在实验最困惑的就是转膜条件了,以前转的都挺好,MARKER很清楚,立春红染完后蛋白条带清晰,现在用同样的条件竟然会转过,蛋白条带弥散,转膜缓冲液新配的(TRIS-BASE
2013年11月30日发布人:hustwb
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100V 2h,之后发现内参b-actin出来了,但是目的没出来
问了抗体公司的客服人员,说是转膜时间长了,小分子量蛋白已经转没了
于是又使用了100V 90min,发现结果仍然是有内参,没有目的蛋白。
难道转膜时间还是长了?
给位
2014年01月06日发布人:moonlight45
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本人用原核表达系统表达了一可溶性蛋白,分子量为16KD.想通过WB检测该蛋白的活性,可转膜2次,均没有成功,该蛋白仍旧存在于凝胶上(考染可见到凝胶上有很浓的带),而预染MARKER转膜成功.该蛋白经ELISA检测具有
2014年06月17日发布人:uaubc
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问各位大侠一个问题:
膜样品方便做热重分析吗?是不是需要把膜进行粉碎?
还有样品需要准备多少克呢? 谢谢啦~~呵呵
顺便能告诉我一般要一个样多少钱,就更好了~~~~,对的,一般都需要先制成粉末,现在的热分析仪一般把热重和差
2015年01月19日发布人:大球球
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向各位高手请教:
作蛋白的Western blotting 用哪个膜更好?国产的和进口的区别大吗?[/b][/color][/size],[size=2][color=Black
2013年11月21日发布人:孢子11
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[size=2][color=Black]采用的是tricine-SDS-PAGE胶跑电泳,但是省去了中间的space胶,每孔上样量15ug以上,半干转膜时电流采用60mA,1h,PVDF膜(45nm),电转液按照takara目录后的配方
2013年07月27日发布人:any333