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过渡清洗5分钟左右,然后用含0.2%戊二醛的TBS固定45分钟,再依照WB的步骤处理后面的过程,后来能得到很好的结果,否则明明蛋白转移到膜上了,后来却消失不见,更不用说免疫检测了。
其它的具体步
2013年08月29日发布人:nvdabing
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[size=2][color=Black][b]大家好!我是WB菜鸟,实验过程中发现问题一大堆,且听我慢慢道来。目的蛋白是127Kda,内参蛋白是37Kda,我用的是BIO-RAD Mini-Protean II
2013年12月07日发布人:笨鸟321
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相关疾病:
头晕
本人以往进行WB实验,较顺利,近一周以来,在转膜时忽然出现,MARKER一点也转不到膜上的情况,就是按既往时间转过后,看着是干干净净的一张白膜,有时候也会有淡淡的要转上去
2013年12月16日发布人:ztonyc
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[size=2][color=Black]如题,实验室新买了台WB的机器,一切都好,就是电泳拔梳子的时候玻璃和梳子抓的很紧,每次拔的时候都很费劲,导致胶常常变形,以前那个BIO-RAD的也没这个问题,会不会是我的胶凝时间不够长?
Ps
2013年12月13日发布人:惊醒ing
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请问:我准备做WB都需要购买什么试剂?哪家公司的产品好?谢谢![/color][/size],[size=2][color=Black]一抗,二抗,显色底物(根据二抗偶联的酶选择)
PVDF
2014年07月03日发布人:00无名指00
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水溶性凝胶渗透色谱做完之后,压力有时变得很大,已经用不管是纯水还是无机盐溶液的都冲了两三天了,压力还是很大,请问各位资深人士,该怎么办才能降压呀?谢谢!,用的什么填料的柱子?葡聚糖和琼脂的柱子容易长微生物,用0.01-0.02%的可乐酮
2010年08月28日发布人:panpan3992@126.
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[size=2][color=Black] 本人这阶段在摸索单细胞凝胶电泳,脱胶等问题已经解决,但阴性的图象不是特别理想,似乎模模糊糊有晕圈,我采用的是贴壁细胞,做之前用胰酶消化。不知会不会对细胞产生损伤?如何解决?
另外,有时
2012年02月02日发布人:guagua
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各位老师,最近本人做WB检测蛋白的表达变化,碰到不少问题,由于学校放假,师兄师姐都不在实验室了,所以特在此向各位老师请教,希望大家能帮我分析一下出现问题的原因,看看有什么可以改进的地方。谢谢
2014年07月03日发布人:mod=8048
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我是一个细胞新手,最近复苏冻了半年左右的hepg2细胞,第一次按正常的程序复苏,刚开始细胞觉得好少,长得也不好,一直没有换液.可到第三天突然觉得培养液有点浑浊,细胞也有好多不见啦,只看到
2012年05月24日发布人:tangxin_80
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我觉得我们实验室做WB摸索出来的条件,及所做出来的条带还是挺好的,所以先发个贴开个头!因为我看见园子里面老是有人在问做WB的条件,这样的话,就可以让新手们少走一些弯路
2013年11月09日发布人:079777chao