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我在做蛋白诱导,载体是pET32a,目前诱导温度是37度,IPTG最大浓度到5mmol/L,但是诱导结果不太理想,主要是量比较小,请问大家,IPTG可不可以加大浓度呢?它的作用原理是什么呢
2023年09月23日发布人:@STAR@
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产物同样电泳鉴定均正确。
然后用连接产物转化感受态BL21(DE3),18小时后挑单个菌落做PCR鉴定有目的条带,然后摇菌提质粒,用BamHI和HindIII双酶切,结果发现我提的重组质粒大小约15000个BP,而且双酶切不开,为什么
2014年03月27日发布人:quiqui008
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老板让我做蛋白质结晶和X射线衍射,实验室没人做过,一头雾水!请大家推荐些这方面的文献,或是一些在这方面比较强的牛人!
拜托!感恩不尽![/color][/size],[size=2
2013年11月21日发布人:bluelake
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大家好,我在做蛋白纯化,用一个不到1000的分子量物质标记分子量为16万的蛋白,标记后想把未标记上的多余的小分子物质出去,我现在用葡聚糖g-100纯化,可使不可避免会有小分子夹杂着出来
2013年04月17日发布人:rxcc33
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,目的蛋白是用pet表达的,后带有his标签,应该是包含体形式。以前也做过其他重组菌株的,并不会这样啊,请教各位帮忙想个办法,怎样才能很好的破碎啊。[/size][/color],[size=2][color=Black]避免气泡的产生,我
2014年05月26日发布人:麦茶tea
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,和做结构的方法相似吧,核磁共振、晶体衍射。。。这个我只听说过,没做过。,我表达的重组蛋白,大小大概10kD左右,标签大概6.6kD,所以加起来应该是十几kD的样子。结果我跑SDS-PAGE明显表达的大小约为25kD不到一点,请各位帮我分析
2016年04月30日发布人:冰激凌
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惨了,我合成了11对引物,大概有400bp,10OD,要1000多,其实不要10OD的,2OD就够了,但是看丁香园有人说价格都是一样,不管是2还是10OD,
现在我这生工代理要2.8元/BP,我该怎么半啊
我以为是
2015年12月04日发布人:969
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郁闷!我的课题刚刚开始,首先要摸索一种重组蛋白表达的最优条件,重组菌是老师给的,我按照《分子克隆》所描述进行操作:增菌到对数生长期、选择不同浓度的IPTG分组诱导,结果SDS-PAGE没有
2014年07月05日发布人:vera+
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[size=2][color=Black]我用杆状病毒表达系统表达出带有6X His标签的蛋白,请问:选用什么公司的蛋白纯化系统好啊?需要选购哪些试剂?焦急等待中ING……[/color][/size],[size=2][color
2023年09月23日发布人:mingming0638
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[size=2][color=Black]本人要用重组蛋白为抗原免疫动物做抗体,因为我的蛋白是人的跨膜蛋白,而重组跨膜蛋白好像和重组可溶性蛋白有区别,更有难度。现请教各位几个问题,望帮忙解答(对这方面不太懂,可能问题有些傻,望理解
2013年12月16日发布人:kuaizige