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昨天冻存细胞,离心完后,加入冻存液,吹打使细胞重新悬浮时,发现离心管底的细胞结成片,不易吹打散开。最后不仅吹打出很多泡沫,还有片状细胞团块存在,很郁闷。我离心的条件是1200转/分,10
2012年07月11日发布人:yhz1973
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[size=2]各位战友,你们好!
我是临床研究生,对一些试验规则不大懂,还希望给予帮助。我分离白细胞后,要做细胞免疫化学法,每次的标本又少,因此就决定把标本冻起来,当时问了几个实验室的技师,他们冻存细胞都是先直接在液氮罐里过夜,次晨
2015年12月10日发布人:雪花子
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我用了一批corning的冻存管,前两天发现几乎所有的管子都进了液氮,请问这种情况会不会发生交叉污染,如果会的话,我的所有菌种是不是都不能要了,还有如果不要的话,液氮罐需要处理吗
2012年05月29日发布人:麦丽素1986
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,他们冻存细胞都是先直接在液氮罐里过夜,次晨投入液氮罐,而液氮上方也就是-80度,因为我细胞只需要保存2~3个月,因此我问实验室技师,能不能直接放到-80度冰箱保存,他们说可以,我也就这么做了,我现在冻存了40个样本,现在很多同学都说这样不行
2012年07月27日发布人:yhz1973
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低于1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)
==> 离心后调整细胞浓度。(不要重新洗细胞)
3. 盖子不紧:
冻存管的盖子一定要拧紧,否则复苏水浴时会渗水,造成污染。
==> 选择原配的管子和盖子(不同牌子/型号的颜色会有差别)
4. 单薄的冻存盒:
放在-80度的冻存盒,壁太薄,细胞在被迅速降温。
==> 选择厚壁泡沫塑料盒,或
2012年01月17日发布人:泡泡
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想麻烦在请教下关于冻存液的问题,DMSO是否需要过滤除菌,还有DMSO如何存放,4摄氏度还是室温,放的时间长了,再用来配冻存液,有影响吗? 小弟我初做实验,很多不懂,恳请各位大哥
2012年05月02日发布人:ququer787
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不加的,是吗?
通常我们冻存的细胞比较多,所以一次配置几十毫升,大概可以用2~3周,不过没超过1个月,以后复苏细胞挺好。个人经验,仅供参考。[/color][/size],[size=2][color=Black]
我一般是临时配置
2012年10月30日发布人:baidukk
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我现在在摸索细胞冻存技术,有一些细节想请教大家.我的步骤是这样的 : (1) 用胰酶消化,并加培养液制成细胞悬液
(2) 收集细胞悬液于离心管,1000rpm ,离心10分钟.
(3
2012年07月21日发布人:leifengta
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[size=2]各位大大,本人前段时间-80 冻的细胞,现在想提RNA, 但-80拿出来后直接马上加Trizol 裂解不了啊,吹打近20min才稍微有溶解,就是一团。后面加异丙醇离心后也不见RNA沉淀,比较急啊,求大大们处理过类似的情况么
2015年04月06日发布人:嗅嗅
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请教大家问题,我买的新的细胞株,刚到后,传代一次,进行冻存。冻存20天后,复苏细胞,结果大量的细胞死亡。我一直沿用的冻存方法及试剂,从没出过问题。我猜想是不是细胞刚到后,传代培养一代,这之间用的是原
2015年02月24日发布人:969