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新年伊始,在这里我祝愿大家在新的一年里,身体健康,家庭幸福,实验顺利,工作愉快,万事如意!
今天主要和大家分享荧光定量PCR技术的有关知识,对荧光定量进行简单的介绍,将分三方面和大家讨论:荧光定量的理论知识,实践理论和常见问题分析、解决
2010年11月18日发布人:西毒
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扩增效果相对较好,但目的片断产量很少,无法回收,请老兄不惜赐教!![/size],[size=2]
已经有目的片断产量很少时,可以用PCR产物作为模板,条件严格一些再进行一次扩增,估计能够得到足够的量。[/size],[size=2]关于
2015年12月01日发布人:园丁##
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“Premier Primer 5”软件,而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。
关键词:PCR;引物设计
中图分类号:Q524 文献标识码: 文章编号:
1
自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应
2011年08月20日发布人:微笑的海豚
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[color=Black][size=4][font=宋体][b]PCR技术概论(为刚开始做PCR的朋友准备) [转自丁香园论坛]
PCR技术简史
PCR技术的基本原理
PCR反应体系与反应条件
PCR反应特点
PCR
2011年08月22日发布人:阿拉蕾
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[size=2][font=黑体]你有pcr扩不出来的情况吗?分析过原因是什么呢?[/font][/size],[size=2]找不到合适的退火温度,延伸时间,退火时间等等[/size],[size=2]
一般都是引物或条件问题
2014年08月26日发布人:莓菓333
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://frodo.wi.mit.edu/[/url]
也可以用Primer5、Oligo6.0等等。到哪找?别着急,咱论坛里有,用起来有什么问题也可以到论坛里问问:
有了软件就该讲讲怎么设计了:
1. 引物设计的原则
细心地进行引物设计是PCR 中最
2011年08月24日发布人:+田田+
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。故又称为PCR反应的增强剂。
类似的辅助成分还有甘油、甲酰胺、牛血清白蛋白、PEG-6000等。
其加入量为:
甘油5-20%,
二甲基亚砜1-10%,
甲酰胺1.25-10%,
牛血清白蛋白10-100ug/ml
2015年10月10日发布人:白白的
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[color=RoyalBlue][size=4][font=仿宋_GB2312]
荧光定量PCR:从标准曲线的制作到基因表达分析[转自 丁香园论坛]
定量PCR定量的基本原理就是用已知拷贝数梯度稀释的样品作出标准曲线,未知样品和
2011年08月24日发布人:白鸟之翼
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],[size=4][color=Purple]你的内对照β-actin都没有出现PCR产物。可见你以前每个环节包括RNA抽提,RT,PCR都有可能有问题。
我的建议是:
1.所有要用的器具都严格用0.1%DEPC处理.
2.从RNA抽提,到RT,到PCR要一路做下来,别停,甚至可以不用测CD,更何况
2011年10月04日发布人:园丁##
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[color=Black][size=3][font=Impact]求助PCR引物情况 [转载]
朋友设计了两对引物做RT-PCR,PCR条件摸索了好长时间,退火温度也基本都试过了,仍然没有结果,目前怀疑引物设计可能有问题,请
2011年09月15日发布人:#甜#