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高手指点一二[/size][/color],[size=2][color=Black]
建议恒流,理由如下:
1.转膜中热量产生很多,导致缓冲液甲醇的挥发消耗,缓冲液成分变化,如果恒压会导致电流不断改变,转膜过程不平稳.
2.调节到恒流后,电压会变化,但是缓冲液中带电粒子运动稳定,有利于转出高质量的膜.
3.一般小分子蛋白(
2014年02月22日发布人:wawa
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我一直用millipore的PVDF膜做Western的预实验,可是无论湿转还是半干转,markre总是转的不好,很容易转膜过度。而且不稳定,有时一个小时转的还可
2014年07月05日发布人:shkudo
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[size=2][color=Black][font=Impact]我用western blot做的P糖蛋白的表达,P糖蛋白是一种膜蛋白,分子量在170KD,属大分子量蛋白,而我的参照基因选择的是β-actin,分子量是43KD。
我
2013年06月05日发布人:cj_mondy
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请问各位网友,转膜液里加甲醇的作用?[/color][/size],[size=2][color=Black]
使SDS-蛋白质复合物变形,更容易走出gel.[/color][/size
2014年05月15日发布人:birdfish
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我想用请问各位实验室达人,我想用流式细胞术测定细胞的p21;p27蛋白的表达以及cyclin D,cycinB等,有可行性么?与western blot方法相比哪个简便,成功率高?还有
2012年03月22日发布人:newway
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液相色谱,单向阀老是堵怎么办呢?
现在缓冲液我尝试用10mM的磷酸盐缓冲液,一跑样单向阀就堵住了,超声一下机器就正常了,但是一跑还是出现同样问题。今天出问题的时候有机相比例是40%,这样的话实验根本没办法做。有什么
2015年12月01日发布人:碎星星
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[size=2][color=Black]WB新手求助:我现在在做磷酸化蛋白,44KD大小。一个样品大概500毫克左右,裂解组织后不加上样缓冲液前的体积是400微升,我觉得加2倍上样缓冲液的话样品会被稀释的太厉害,所以就加了5倍的上样
2013年05月21日发布人:dream2013
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最近做western blot ,电泳,转膜感觉没问题,转出的膜用丽春红染色,条带清晰,用5%的脱脂奶粉封闭1小时,加一抗,一抗用TBS稀释,另加5%BSA,4度过夜,用
2013年10月09日发布人:ilovegaga
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我做了一个基因的不同发育时期的western blot 和 RT-PCR,结果却呈相反趋势,怎么回事?要怎样去解释呢??[/color][/size],[size=2][color=Black
2014年05月23日发布人:qqq111
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电泳用150v,大概整个跑下来40分钟到1小时的样子,
胶跑好后的转膜过程是:
1..膜剪好后先在甲醇中浸泡10分钟左右,
2.铺“三明治”,转膜液用的是20%甲醛的,湿转
3.电泳和转膜用的都是biorad的机子,
4.铺好后
2014年02月08日发布人:remonte