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[size=2][color=Black][b]小弟要用考马斯亮蓝G250溶液测蛋白质含量,但是在配制考马斯亮蓝溶液这里出了问题
我是按照主流的方法配的,95%酒精+100mg考G250+100ML 85%磷酸,定容到1000ml
2013年06月03日发布人:free
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12000rpm离心,取上清作为蛋白质样品作SDS-PAGE分析。结果靠马斯亮蓝染色发现,对照和诱导之间几乎完全没有差异(目的条带:蛋白+载体= 63 KD,在66KD附近都有条带)。然后我又试了不同诱导时间,结果还是没有什么差异。请教各位老师
2014年03月01日发布人:docsy
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浓度过高应该没多大关系,考马斯染色一般只需30分钟左右就可以了,假如染色时间过长就很难脱下了,不过你也可以在脱色液中脱色,不过脱色温度要保持在50度左右,你可以放在烘箱里过夜脱色或至少脱色6小时,看看能不能脱掉吧![/color][/size
2014年06月28日发布人:sunnyB
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[size=2][color=Black]我的实验中需要用PCR法扩增一段启动子序列,该段序列包含很多顺式作用元件,GC含量很高,达75%以上。
努力了一个多月,未得到任何扩增产物(假阳性都没有),唉~~~~~~怎一个郁闷了得。
我
2016年03月01日发布人:笑弯了腰
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亲爱的朋友们啊,
最近用台盼蓝染色判断细胞活力,居然无法用肉眼判断细胞活力,请各位朋友们指导下,我该怎么去判断呢?》[/size],[size=2]再上图~~~~~~~~~~~[/size],[size=2]怎么染成
2015年04月06日发布人:sistis
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最近在检测玉米浸泡水中的蛋白质含量,发现用考马斯亮蓝法测出的蛋白质含量很低,在1g/L以下,而用凯氏定氮法测出含量在100g/L以上。是否说明其中大部分都是小分子的多肽和氨基酸,大分子蛋白含量很少?考马斯亮蓝法的局限是否在这里?对于小肽
2015年04月01日发布人:疲惫黑眼圈
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文献说。为避免基因组的扩增,引物设计最好能跨两个外显子。这是值什么?是上游引物在第一个外显子上,下游引物在第2个外显子上吗?这样不就把2个外显子之间的内显子给扩出了?
还是2个引物在2个内显子上,中间是外显子
2015年08月31日发布人:join
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我克隆出来了一个基因的全长,想克隆基因的启动子,想问下有没有哪位大侠克隆过启动子的,大家交流一下,用试剂盒的也可以,不是用试剂盒也可以的。麻烦大家了![/font][/size],[quote]原帖由
2014年10月26日发布人:粉色萤火虫
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小生作一新分子的原核表达,预测分子量9.0 KDa左右,载体是pGEX-2T,GST融合载体,测序也正确,试过37度,30度,28度,IPTG 0.4-1.0mM,都不表达,连包涵体都没有。真急人啊。各位提提建议,不甚感激[/font
2013年07月30日发布人:嗅嗅
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[size=2][font=黑体][color=Black]本人课题是有关ZSM-5分子筛催化方面的,查阅相关文献发现有人证明催化剂失活与3745和3726cm-1处羟基的振动强度有关,也就是说分子筛失活快慢跟分子筛内部缺陷/分子筛外表
2015年12月14日发布人:966735obeng