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buffer上样?
2.顺便问一下5%的浓缩胶和12%的分离胶在室温下多久凝聚是正常的?
请各位多多指教![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
1.loading buffer应该在加样前与
2014年04月13日发布人:u76mp
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发生漏胶的现象,你所说的应该是这样把,建议你回去检查一下你的电泳梳子,看看是这样的么,为了避免你可以加完浓缩胶后用水来隔绝空气.[/color][/size],确实是,但是问题还是出现了。你是说加完浓缩胶后两边加水?,[size=2
2014年02月20日发布人:33号
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[size=2][color=Black]
各位高手,你们好。向你们请教一个问题。
以前一直都在做WB,一直都没出现什么问题。但最近不怎么了,PAGE胶中的浓缩胶老是凝固不好。如梳子齿之间的胶会缩短,导致上样量不能太大。有一次还居然在
2014年02月03日发布人:pou
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[size=2][color=Black][font=黑体]自己是新手,自己做自己的目的蛋白已经两个多月了,一直没有结果,很着急,我的方法过程是这样的。
1。自己的蛋白是组织蛋白,刚提取的,目的蛋白是20kd的。
2.用5%的浓缩胶
2014年02月10日发布人:windboy
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多多指教,不胜感激!!
我们实验室的westernblot设备是bio-rad半干转系统。
我做的蛋白是33kd,5%的浓缩胶(电压60v),12%的分离胶(电压110V)
我的加样的buffer用的是碧云天的
问题:
1,蛋白和
2014年03月03日发布人:sunnyB
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[size=2][color=Black][b]
最近在做WB,已有资料表明,分离胶一般30-60min,浓缩胶15-30min即可凝固,可我灌的胶(10%分离胶,AP用量为0.05ml,TEMED为0.002ml;5%浓缩胶,AP用量
2013年05月21日发布人:any333
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。
(3)减小电压(我用的是恒压),浓缩胶从80V到50V,分离胶从130V到100V都跑过,但是也没能解决问题,低电压上半段是直线,中间就开始扭曲了,下半段还是会变成笑脸。
(4)尝试了冰浴,减少散热不足导致的胶变形,但是结果和(2)的结果一样,只在前半段比较好,后半段就不行了。
而且右图是在进
2013年10月10日发布人:雪山飞鹿
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我的目的蛋白为120kD,内参为55kD,请问各位前辈,如何选择浓缩胶和分离胶的浓度,用8%可以吗?还有就是湿转的条件是什么?请各位前辈不吝赐教,先谢谢了?[/color][/size
2013年12月14日发布人:pencil菲
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[/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
据说是很难做,我现在也想做大分子的蛋白,但是一直分离不出目的蛋白,甚至连全蛋白都跑不好,不知何原因,我用的事3.5%浓缩胶和6%分离胶,请高手指点一二。谢谢
2013年12月05日发布人:avi317
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[size=2][color=Black]各位高人,请问PAGE电泳时应该怎样选择电压大小?时间怎么定?谢谢[/color][/size],[size=2][color=Black]
60V进胶,90V浓缩胶,120V分离胶即可。每种
2014年05月06日发布人:911