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Edman测序
只能鉴定一个氨基酸,大致流程如下:首先利用异硫氰酸苯酯(PITC)特异性识别并连接在待测蛋白质的N端氨基酸上形成PITC-蛋白复合物;在酸处理条件下,PITC连接的N端氨基酸被切割,形成不稳定的
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蛋白质相互作用分析服务
结合,再加入蛋白A/G形成抗体蛋白复合物,进行离心、分离,使抗体蛋白复合物沉淀,弃去上清液,最后用质谱技术鉴定沉淀下来的蛋白质,进而证明两者间的相互作用。仅适用于分析稳定或者强烈的蛋白质间相互作用
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蛋白质相互作用分析
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Western Blotting
膜20min,另一装转移缓冲液浸泡海绵和滤纸20min2)取下胶,切除浓缩胶部分后,将分离胶浸入转移缓冲液中约5min3)按顺序安装好转膜装置(黑色板-海绵-三层滤纸-凝胶-硝酸纤维膜-三层滤纸-海绵
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WB检测
20min,另一装转移缓冲液浸泡海绵和滤纸20min2)取下胶,切除浓缩胶部分后,将分离胶浸入转移缓冲液中约5min3)按顺序安装好转膜装置(黑色板-海绵-三层滤纸-凝胶-硝酸纤维膜-三层滤纸-海绵
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Co-IP质谱分析
裂解液;用结合抗体的亲和珠孵育细胞裂解液,抗体与抗原蛋白特异结合形成抗体蛋白复合物;离心、分离抗体蛋白复合物沉淀;将抗体蛋白复合物进行质谱鉴定。Co-IP质谱分析技术面临着抗体选择的问题,故必须在实验
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蛋白胶条鉴定
复合物,该复合物表现为SDS的带电特性(负电荷),在电场力的作用下,蛋白质-SDS复合物在PAGE胶上电泳迁移,蛋白质样品会按照样品分子量的大小分离成条带,从而实现蛋白质的分离。每一条蛋白条带中的蛋白
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Western Blot
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DNFB和Edman原理相同吗
的序列测定。其基本原理是利用异硫氰酸苯酯(PITC)特异性识别并连接在待测蛋白质的N端氨基酸上形成PITC-蛋白复合物;在酸处理条件下,PITC连接的N端氨基酸被切割,形成不稳定的PITC-氨基酸
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SDS-PAGE如何工作
疏水键,并与蛋白质分子按一定比例结合,形成等密度的短杆状复合物。不同分子量的蛋白质形成的复合物长度不同,复合物长度与蛋白质的分子量呈正相关。SDS使蛋白质带负电荷的数量远远超过其原始电荷,从而掩盖
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