-
[size=2][color=Black]
这是我第一次用Ni柱纯化的蛋白SDS-PAGE结果:左侧是分子量标记,右侧最亮的条带是目的蛋白,但是还有不少的杂蛋白污染。不知这样的结果怎么样?是不是分离纯度太低,需要改进?我分离蛋白采用的是
2013年05月13日发布人:如影随形
-
[size=2][color=Black]
各位战友,大家好,我是一个原核表达纯化的新手,手里有两个待纯化的蛋白,准备纯化脱盐后给细胞用。
蛋白是在N端有6his标签,用的是Ni柱纯化(AKTA一款比较老的纯化仪)。
大致步骤如下
2013年10月31日发布人:#甜#
-
[size=2][color=Black][align=center][b]【专题讨论】^^^^^不同的目的蛋白在pGEX上表达纯化后,均遇到了一条杂带,看着很诡异(附图)^^^^^ [/b][/align][/color][/size
2023年07月15日发布人:ilovegaga
-
[size=2][color=Black][font=Arial]
我要纯化一个带His标签的蛋白,但是无论如何都纯化不出来。我用的是Qiagen的Ni柱纯化的,用的是非变性的方法,试剂配制如下:
lysis buffer: 50mM
2014年02月12日发布人:水母
-
]
是不是没有挂上柱啊,我是加完样品后,让样品留到柱子中后,将下端封闭,静止一个小时。[/color][/size],[color=Black]
相关疾病:
电击伤
条件不明,无法分析。请点击看我的签名档“如何提蛋白质纯化问题
2013年12月27日发布人:gemei0115
-
。[/color][/size],[size=2][color=Black]溶菌酶溶液是不是放-20了
放4度就ok了[/color][/size],[size=2][color=Black]
应该不能吧,怎么知道不能破菌了,应该是你的蛋白不表达
2013年07月19日发布人:zhihui小新
-
[size=2][color=Black]
情况如下:
基因工程发酵纯化一种38肽(cP),载体为pet32a,宿主菌为大肠杆菌BL21,目的蛋白为硫氧环蛋白-cP融合蛋白;测序证明碱基序列正确,小量发酵验证融合蛋白大小正确;问题及
2014年01月06日发布人:superboy
-
[size=2][color=Black]由于要保证我抽屉蛋白质的活性,且在没有超声波的情况下,我用进口分装Amresco 的溶菌酶破大肠杆菌,半年了,摸索各种条件,pH 8.0,pH剃度啊,加与不加0.1mMEDTA,NaCl浓度剃度啊
2014年05月29日发布人:kulee
-
High Q纯化,将蛋白溶解在9M尿素中,调PH=8.3,BufferA,B,C的PH=8.3,过柱子后,蛋白大部分存在于穿透液中,有部分蛋白挂柱,但是随着Buffer B盐离子浓度提高达到1 M NaCl,只洗下杂蛋白,没有多少目的蛋白
2014年01月22日发布人:misswu61
-
或其它氧化物氧化,从使蛋白失去活性。
所以,在蛋白纯化和保存时,在溶液中加入一定量的DTT,以免蛋白-SH被氧化而失活。
但这里就有一个矛盾,DTT该加多少量,以使-SH保持还原状态,而使二硫键免遭还原?
除了上述作用,DTT还有
2013年12月01日发布人:iii_ii