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[size=2][color=Black][font=黑体]
做了五个月的Western Blot ,有一点点小心得,给新手点经验.
蛋白提取:
1. 总蛋白提取(胞膜,胞浆,胞核):
组织匀浆后,15000g, 4度, 20
2013年11月08日发布人:applebook=213
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是十万个细胞?这么多阿?我是用来提RNA的,Hep3B。这样好像也太多了吧。[/color][/size],[size=2][color=Black]要記得細胞接種密度太低會長得很差啊~
這細胞你自己應該養過吧?
你應當把平常慣用的培養
2012年09月15日发布人:pencil菲
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荧光显微镜,100倍;
4.培养基种类:1640+10%胎牛血清;
5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长;
6.图片目的:鉴定食管癌细胞表达MMP-2,胞浆中绿色荧光为MMP-2,细胞核红色荧光为PI复染。 [/font][/color
2013年01月05日发布人:applebook=213
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那瓶变色的换液了,可是换完液就觉得又变黄色了, 镜下观察细胞很不规则,胞核有的就看不到,而且胞质和胞核里面有很多黑色小点. 我这已经是第二次培养了.第一次失败了.现在很是着急,实验不能继续啊, 请有经验的师兄师姐 各位老师帮忙分析一下
2012年03月13日发布人:49888
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爬片之前要包被多聚赖氨酸以免洗片时细胞掉片
3. 固定,我用的是预冷纯丙酮固定15分钟(应为丙酮有毒,操作的时候小心些),这步应该注意:丙酮很容易挥发,但又要保证固定期间不能干片,所以要多滴加丙酮,其间用盖子盖住,这一步不要在6孔板内进行,因为丙酮会将其熔化.
4. 不知道你的一抗是 在胞浆表达还是在胞核表达
如
2015年11月17日发布人:jude
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,完全没有问题[/size],[size=2]
应该没问题[/size],[size=2]
我有過類似的經驗
不過那批的細胞之後拿去解凍全都死亡
請問一下版大 你隔夜看凍管的細胞液體已經是固態還是液態?
我那時候放置隔夜仍是液體
2015年03月17日发布人:junhun
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出现长长的细丝,我给取了个名字叫“双尾蝌蚪”,只要出现这样形态,我就放下了90%的心,但这次不同,虽然第一天很好,到第二天细胞就开始飘,越飘心越凉啊……[/size],[size=2]
这是第2天的情形,看箭头所指,圆形漂浮的细胞,胞内可见固缩的高密度物质,极像凋亡细胞!
同时把以前分化很好
2015年10月15日发布人:雪花子
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],[size=2]破骨细胞的鉴定可以分多种:这个是我在一篇论文中找的,具体你可以找一下论文!
1.形态学观察 破骨细胞是一类多核、体积大的巨细胞,在相差倒置显微镜下观察容易识别。细胞直径达30~100μm,含几个至数十个核。培养2小时后胞浆
2015年07月11日发布人:雪原
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PBS冲洗一遍,可是不知道是何原因我的细胞每次在已经贴壁,而且有一部分已经变成梭形后,就死了。请给指点啊。[/color][/size][/b],[size=2][color=Black]
我認為你的問題是在於細胞處理過程而不是明膠包被
2012年07月25日发布人:vivian4123
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[size=2][color=Black][b]做了五个月的Western Blot ,有一点点小心得,给新手点经验.
蛋白提取:
1. 总蛋白提取(胞膜,胞浆,胞核):
组织匀浆后,15000g, 4度, 20分钟后,取上清
2013年07月01日发布人:applebook=213