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[size=2][b]从左到右分别是:质粒用Agel酶切,质粒用Agel酶切,marker,原始质粒。酶切体系50ul,质粒用6ug,37度水浴孵育2.5h, 为什么出现这种弥漫的条带?[/b][/size],[size=2]这是双酶切
2014年11月29日发布人:@STAR@
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[size=2][color=Black][b]
小弟最近要培养胎鼠成骨细胞,联系了几家试剂公司后发现没有卖0.2%II型胶原酶的,都说要自己配,今天货刚到,是100mg装,300单位/mg可是我又不知道该怎么配,请大家帮帮忙。急啊
2012年06月30日发布人:9900
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先用胰酶消化细胞,分散成单细胞悬液,计数,然后稀释到需要的浓度,接种就OK了[/color][/size],[size=2][color=Black]
不同细胞接种量不同呀,一般转染需要60-80%左右的细胞吧,接种24小时后转染。
你自己需要摸索一下实验条件,就是细胞消化\计数,不同浓度接种
2012年06月20日发布人:阿k
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[size=2][font=黑体]
我想对PCR产物分析一下,全部测序太贵了,不知道PCR产物是否可以直接酶切,需要注意些什么问题。谁有没有比较好PCR产物直接酶切的protocol呢,请给我传一个,本人不胜感激![/font
2015年12月04日发布人:铜雀
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半乳糖醛酸酶( PG)活性:Amnuaysin等(2012)和Figueroa等(2010)的方法。取2g样品,用6mL酶提取液( 6%NaCl,内含0.6%EDTA,1%PVP) 匀浆 然后再10000r/min离心20min,上清液即为粗
2023年08月10日发布人:hey_bye
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关于该细胞的经验以及注意事项,希望能对大家有所帮助!
培养条件:1640培养液+四季青10%新生牛血清。PH:2gNaHCO3每1L 1640培养液。
在我培养的过程中,从来没有用过胰酶消化传代。我一直是直接用弯嘴滴管吹打的。只要
2011年12月15日发布人:zwsyrt
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[size=4][color=Black][b]求助:PCR产物是否可以直接酶切呢 [转载]
我想对PCR产物分析一下,全部测序太贵了,不知道PCR产物是否可以直接酶切,需要注意些什么问题。谁有没有比较好PCR产物直接酶切的
2011年10月04日发布人:芙蓉宫主
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如果你的胶原不是无菌的,那就先以0.1%冰醋酸溶解后一起过滤,但可能比较费力。[/size],[size=2]
请问胶原酶能保存多久?[/size],[size=2]
是呀,过滤确实比较麻烦,上次过滤胰酶没把我累死!呵呵可是我用的不是无菌的,我查的资料也没有二型胶原酶的具体配制方法!但是有的资料上说,胶原酶用基础营养液或Hanks液配
2015年12月11日发布人:芙蓉宫主
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“分子量变成了很高的537.9+”。
预期分子量是491+?,小数点后一位是什么?
如果是491.0,那分子量加了是47额。。,你的流动相是什么?:),质核比差了快47了,感觉不太可能是加钠
质谱条件和化合物大体结构不清楚不太好说
建议尝试负离子模式,做MS/MS比较确定,同意2楼的说法。
酸性条件下,加钠峰应该不太可
2015年10月13日发布人:zouyou
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。复苏后第一代长得很好,5天长到约80%。传代是用的0.25%胰酶,也是杭州吉诺的配好的。我加的是1ml,它消化的很快,常温大约40-50秒细胞即开始回缩了。倒去胰酶后,加入10ml培养基,吹打后分成2瓶。第二天见到细胞大部分都贴壁了,细胞
2012年02月12日发布人:大白菜