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最近刚又湿转改为干转,原先师姐的条件是固定60V,75mA,1小时,她作得挺好的。师姐走后,我用她原来的条件,总是发现正极的滤纸焦黄焦黄的,膜也烤糊了,ECL显色背景很厉害,而且有些指标
2014年03月03日发布人:is2011
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[size=2][color=Black][font=黑体]各位战友,本人最近开始做western,但似乎很不成功。主要表现为:ECL发光、压片后几乎全是光板,偶尔有极其微弱的条带,前面实验证明一抗和二抗都没有问题。怀疑问题出在转膜上
2013年09月04日发布人:bohe221
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200mA基本上都是超过100V
不知道什么原因
偷偷问下 转膜一般恒压还是恒流?又或者两者皆可?[/color][/size],[size=2][color=Black]
转膜,应该是恒流和恒压都可以的。看个人的习惯吧。我开始用恒压,但机器修过一次后发现恒流比较好用,就改恒流了。[/color][/size],[size=2][color=Black]
2014年01月14日发布人:fsdd817
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我在SDS-PAGE胶跑完后,一半考染,一半转膜,考染结果显示条带还是比较清楚的,转膜条件是:300mA,2h,转膜后用丽春红染色,把膜放入丽春红稀释液中5-10min,整张
2014年02月07日发布人:966735obeng
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最近要做western blotting磷酸化蛋白和未磷酸化蛋白,因为样本珍贵,想要跟大家交流一下同一张膜如何重复使用的问题。我也看了一些战友的帖子,多使用膜剥脱液
2014年03月12日发布人:yonger
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目前你的仪器使用的是端窗还是侧窗的光管呢 针对这块的区别你知道多少呢 欢迎发言哦谢谢,我们的是端窗的,XRF好像端窗的多些,对啊 有端窗也会有侧窗,XRF,目前有哪些品牌呢,好在哪儿呢?,国外用的比较多的有帕纳科、热电、牛津、岛津
2015年03月27日发布人:大学习
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微栅或者碳支持膜一面有金属光泽,另一面稍微暗淡,在灯光下变换角度,有时会出现彩色。
1、暗淡一些的那一面是有膜的一面吧?
2、有膜的一面是正面还是反面?
3、中镜科仪的铜网上的“Z”字在正面还是反面?
4、滴样品是滴在膜在上的那一
2015年04月08日发布人:jkh123
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[size=2][color=Black][i]最近在做小分子17KD蛋白,电泳和转膜后未见明显小分子蛋白,附上转膜后立春红染色图片一张,图中17kd到10kd相应位置的蛋白少,似弥散,模糊不明。考染后蛋白分布也是这样(未附图)。请大家
2013年07月06日发布人:sunshine039
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[size=2][color=Black]请教大家
western转膜之后,封闭之前要不要洗膜?还是转完之后直接放在封闭液里?这样的话转移缓冲液中的甲醇会不会有影响?
再有,封闭之后,上一抗之前要不要洗?
谢谢大家![/color
2014年01月19日发布人:摆渡客
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染胶我没试过,但染膜绝对没问题![/color][/size],[size=2][color=Black]
我用的是第一种方案,染膜1-5分钟就行,另外你要注意一下膜的正反面,正面往往比反面明显的多
2014年04月16日发布人:junjie05