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[size=2][color=Black][font=黑体]我是个初学者,准备开始提蛋白了,查了一些资料,但心里实在忐忑不安,没有把握。以下是我的裂解液配方及操作步骤,不知妥否,请各位大侠点评,以便改进。
裂解液配方:
尿素:8M
2013年06月08日发布人:linlinstar
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各位战友,大家好,我是一个原核表达纯化的新手,手里有两个待纯化的蛋白,准备纯化脱盐后给细胞用。
蛋白是在N端有6his标签,用的是Ni柱纯化(AKTA一款比较老的纯化仪)。
大致步骤如下
2013年10月31日发布人:#甜#
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看着名字,毫无疑问是真正的创新药。
这是个什么东西,感觉上类似于双特异性抗体的概念一样,加强CDC作用的VEGF拮抗剂?
CXSL1500009 重组人血管内皮生长因子受体-抗体-人补体受体1融合蛋白注射液 治疗用
2015年09月07日发布人:彼岸花opp
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我要纯化一个带His标签的蛋白,但是无论如何都纯化不出来。我用的是Qiagen的Ni柱纯化的,用的是非变性的方法,试剂配制如下:
lysis buffer: 50mM
2014年02月12日发布人:水母
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[size=2][color=Black]各位战友,大家好!最近我用IPTG诱导蛋白表达,第一次诱导的蛋白表达出来了(诱导浓度是0.1mM)。接下来我就按照师兄的说法,把已经诱导出蛋白的菌液吸出5ul到一个含有5ml LB的试管中摇到OD
2023年08月18日发布人:zhy平平
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[size=3][color=Black][font=仿宋_GB2312]请教各位蛋白版高手,我最近准备做一个分子量为600多KD的大蛋白的WB实验,因该分子较大,内参选择、MARKER、转膜条件出现疑问。
因为平时大家常用的主要
2014年12月26日发布人:Ao7
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[size=2][color=Black][font=黑体]表达的GST融合蛋白大小大约46KD左右,用GSH洗脱时,洗脱液含有较多的杂带,请问大家有什么办法能减少杂带的量。[/font][/color][/size],[size=2
2023年08月30日发布人:3N4G
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[size=2][color=Black]我现在在做一个蛋白,发现是个可溶性蛋白,老板要求在上清中获得这个蛋白,但是,我用 PEG6000沉淀 1.2000G离心30分钟竟然什么也没有?菌液是500ML,PEG600=35g,请问有什么
2014年01月09日发布人:hustwb
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用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年07月22日发布人:shanzhapia696
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[size=2][color=Black]请教大家,对磷酸化的蛋白与对普通蛋白做western 有什么区别,需要注意些什么?多谢.[/color][/size],[size=2][color=Black][font=Verdana
2014年05月12日发布人:wanglaoshi