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请教pET32a(+)空载体转入大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导后是否有表达?如果有表达的蛋白分子量为20KD?[/font][/color][/size],[size=2
2014年05月09日发布人:gmjghh
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4、确定是否毒性蛋白抑制表达。,[size=2][color=Black]相关疾病:
头痛
谢谢楼上几位的回答。我仔细检查过了,排除取错电泳样品可能,因为是多次实验。小量表达测试也重复过,是高表达。上清和沉淀在靶蛋白位置无明显高表达
2013年12月14日发布人:zhy平平
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[size=2][font=黑体]我想问一下,我先用乙醇从某植物中得到乙醇粗提物,然后就用乙酸乙酯进行萃取得到乙酸乙酯萃取物(成分很复杂),最近老板要我过柱子,用的洗脱剂为乙酸乙酯:正己烷=1:4——乙酸乙酯:正己烷=2:1——二氯甲烷
2014年10月31日发布人:天下虫子
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[size=2][color=Black][font=黑体]我将目的基因与表达载体重组后,经测序鉴定已正确连接,但是却表达不出目的蛋白,诱导条件IPTG浓度从0.1-1.0mM,时间从3h-10h,温度从25-34度都摸索过,但是诱导前后
2014年07月08日发布人:小荷尖尖
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我们自己构建了原核表达系统PGEX-4T-1/cypD,经过测序检查表明该系统构建没有问题,然而摸索了快一个学期了,从菌液量,IPTG浓度(0.2 0.6 1.0mM)三个梯度,诱导温度
2013年06月05日发布人:sunshine039
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我是第一次养HepG2 细胞,不知道养的细胞正常是不是这样的,发张图片,给大家看一下! [/b][/color][/size],[size=2][color=Black]
培养条件:10%FBS+DMEM[/color][/size],[size
2012年06月15日发布人:101010
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, MM, 严格按照invitrogen公司的操作手册进行,一直没有目的蛋白的出现,同时使用的阳性对照Albumin有表达,就是我的蛋白没有表达。[/font][/color][/size],[size=2][color=Black]你再考虑以下问题:
1)你构建的载体测序确定过吗?正
2013年11月05日发布人:68943512yao
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小鼠的,一只大约5-8*10*6个,铺12孔板的一个孔,每孔加1.5ml,大概两天换一次液,不用传代,它不会增殖的,也活不了多久,1-2周。[/color][/size],[size=2][color=Black]
我养过巨噬细胞,原先是
2012年05月24日发布人:junjie05
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[size=2][color=Black][font=黑体]大肠表达系统中,为什么有时候只能在高温(30度以上)表达蛋白,但低温就表达不出来了呢?
高温是包涵体的形式
难道是低温表达的蛋白,因为可溶而被大肠降解了?[/font
2013年12月06日发布人:8princess8
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正在做蛋白表达,用的载体是pET-32,宿主菌是BL21(DE3),蛋白大小是54KD左右,从SDS-PAGE上来看,在66KD处有表达。
所以想问一下,这个表达的蛋白是不是还加上了从
2013年07月29日发布人:woshiduiyan