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各位战友,大家好,我是一个原核表达纯化的新手,手里有两个待纯化的蛋白,准备纯化脱盐后给细胞用。
蛋白是在N端有6his标签,用的是Ni柱纯化(AKTA一款比较老的纯化仪)。
大致步骤如下
2013年10月31日发布人:#甜#
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我要纯化一个带His标签的蛋白,但是无论如何都纯化不出来。我用的是Qiagen的Ni柱纯化的,用的是非变性的方法,试剂配制如下:
lysis buffer: 50mM
2014年02月12日发布人:水母
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蛋白的定位,上述几种做法的差距在哪儿,意义是什么呢?还望给位大侠赐教!,实质问题就是蛋白质的细胞定位的实验问题,方法远不止你说的。蛋白进行免疫荧光标记后,用激光共聚焦显微镜观察。量子点标记后连接上看克隆抗体进入细胞核,与目标蛋白质结合,可以
2015年11月15日发布人:mimima
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[size=2][color=Black]各位战友,大家好!最近我用IPTG诱导蛋白表达,第一次诱导的蛋白表达出来了(诱导浓度是0.1mM)。接下来我就按照师兄的说法,把已经诱导出蛋白的菌液吸出5ul到一个含有5ml LB的试管中摇到OD
2023年08月18日发布人:zhy平平
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[size=3][color=Black][font=仿宋_GB2312]请教各位蛋白版高手,我最近准备做一个分子量为600多KD的大蛋白的WB实验,因该分子较大,内参选择、MARKER、转膜条件出现疑问。
因为平时大家常用的主要
2014年12月26日发布人:Ao7
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请教悬浮细胞原位杂交合荧光标记检测凋亡的经验:哪位老师同学养过悬浮细胞的?我现在想拿这些悬浮的细胞检测其凋亡情况和做原位杂交,不知道细胞如何贴到载波片上,应该用何固定液固定?固定后如何
2012年10月22日发布人:mamamiya
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[size=2][color=Black][font=黑体]表达的GST融合蛋白大小大约46KD左右,用GSH洗脱时,洗脱液含有较多的杂带,请问大家有什么办法能减少杂带的量。[/font][/color][/size],[size=2
2023年08月30日发布人:3N4G
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东西都不会,请多多帮忙!十分感谢!
听说国产的蛋白质预染marker效果都不是很理想,请问是这样吗?如果是买进口的 蛋白质预染marker都哪个公司的比较好,价格也相对比较便宜的?[/b][/color][/size],[size=2
2013年08月16日发布人:bamboo16
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[size=2][b]RT,国产试剂与进口试剂用着区别大吗?[/b][/size],[size=2]不能一概而论,但总的来说还是进口的用的放心。但现在进口的假货也多了起来。[/size],[size=3]很大吧。
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2015年06月24日发布人:XYZQ
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2015年06月19日发布人:ay123