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全蛋白抗原制备
细胞中; 3. 稳转池验证:30ml 摇瓶小试表达目的蛋白和纯化。将细胞表达上清通过合适的,可与重组表达目的蛋白的标签结合的柱填料进行纯化,跑 SDS-PAGE,通过已知确切浓度蛋白作为control
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transwell侵袭
transwell侵袭细胞侵袭细胞侵袭实验目的:研究趋化因子或其他营养物质对细胞侵袭的影响实验原理:将细胞种于上室,趋化因子等种于下室,细胞会向营养成分高的下室跑。与迁移实验不同是侵袭实验需要在小室
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transwell转移
原理:常用8.0μm,12.0μm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数进入下室的
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基因甲基化检测
程度后,挑选白色菌落进行菌落PCR (体系同BSP)。8、挑选上一步中跑胶出现条带的白色菌落先将其加入约3ml的不含抗性的LB液体培养基中摇过夜,后取其1ml送去测序。其余的菌液取500ml加入
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细胞迁移/侵袭实验
,下室加入某种趋化因子,可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。 (3)肿瘤细胞迁移实验 常用8.0、12.0μm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数
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transwell实验
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蛋白质N端测序-Edman降解法
,根据洗脱时间确定氨基酸种类。 蛋白N端测序,要求纯蛋白或者接近于纯蛋白,可通过SDS-page胶考染判定;纯蛋白样本可提供粉末。如果蛋白是复合物,可以通过跑SDS-PAGE胶分离蛋白,再
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蛋白质质谱鉴定
手段,在科研开展中频繁被使用。CO-IP蛋白鉴定有3种方法,1、跑SDS-PAGE胶进行分离,通过处理组和对照组相比较,鉴定有差异的蛋白质条带;2、从上至下,切取每一小段胶进行酶解,最后合并进行质谱
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western blot服务+灰度分析及作图
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transwell侵袭实验
下室跑,但与肿瘤细胞迁移实验不同的是,聚碳酸酯膜上室侧铺上一层基质胶,用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶(MMPs)将基质胶降解,方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可
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