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最近在做重组蛋白表达,表达之后也有目的条带,但是就是分子量比理论值要偏大。我的质粒是经过测序的,没有碱基的缺失和突变。另外,我做的是SDS-PAGE.偏大5-50都不等,各位大师帮帮忙,解决下... 着急啊!!!,SDS-PAGE确定的
2016年03月21日发布人:huali
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诸位亲们 单位要买一台uplc-tqd,那在买仪器的同时可以提那些附带要求?我比较关心仪器耗材这一块,如果不在购买的时候“乘火打劫”一下,以后再维护起来可就要花大价钱了,这可是有以前惨痛的教训的,一个小小的垫片坏了 要换整个件 放血啊
2010年11月28日发布人:jixiaohu7223
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模板,延长延伸时间并且做的是梯度,之后仍然没有条带,不知道是不是酶量少了,或者就是引物自身的问题了,忙活来忙活去,着实郁闷啊
2014年09月26日发布人:yonger
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诸位战友,我正在做HUVEC原代培养,一个月了,还没看见一个内皮细胞,快崩溃了,有个问题现在一直没解决,就是20cm左右的脐带,冲洗后,注入0.25%胰酶及0.02%EDTA混合液15
2012年05月28日发布人:8s5g
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想请问各位:胶原酶五配制的时候直接用HBSS溶就好了吗?还是要在36.5或37度下溶2-3小时,那样活性会不会丧失?还是在常温下搅拌后四度过夜?然后再0.22的膜过滤并分装对吗?这些
2012年09月15日发布人:october7
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目标蛋白表达量少,想上样达到最大,请问最多能上样多少ug,而且蛋白条带不会弥散,
有人说只能90ug,但是,我上样到90,依然条带很浅细,几乎照不出来.请大家指教[/color][/size
2014年01月07日发布人:u234
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1.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清
2.加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)
3.显微镜
2012年06月24日发布人:TAT
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我做的克隆表达目的片段与载体连接后酶切及PCR鉴定都是正确的,为什么表达量特别小呢,只见一条细线,大小应该是表达的融合蛋白,我优化过诱导时间,IPTG浓度,诱导温度但都无变化,我还换过几次载体
2013年07月20日发布人:bananapeople
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保存。[/color][/size],[size=2][color=Black]
细胞培养中胰酶可用Hanks液溶解分装,常用2。5%的,最好用青霉素瓶,一瓶5ml,一瓶25ml的培养瓶放一半,平常都是放-
2012年10月05日发布人:tie8
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做热重分析时,一次实验样品要多少用量?,通常10mg左右。
要看是什么样,无机物可以多些!
另外,如果需要测试的变化小可以样品更多些!,不同仪器公司的进样量是不同的。PE公司是4到5mg,耐驰是10mg左右。,每个仪器都有一个样品用量
2015年11月02日发布人:yuanyuan