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[size=2]这是我提取质粒后双酶切坚定地图谱,marker是10000的,最亮的那个条带是2000大小。双酶切的酶是HindIII和BssHII,切完之后应该出现的插入基因条带大小为1916bp,但是现在酶切出现了这么多条带是怎么回事
2014年10月28日发布人:purrr
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[size=2][b]从左到右分别是:质粒用Agel酶切,质粒用Agel酶切,marker,原始质粒。酶切体系50ul,质粒用6ug,37度水浴孵育2.5h, 为什么出现这种弥漫的条带?[/b][/size],[size=2]这是双酶切
2014年11月29日发布人:@STAR@
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[size=2][color=Black]
最近一段时间在提心肌细胞蛋白,收集细胞时先用胰酶消化下来后统一加裂解液,但是蛋白浓度很低。分析可能是收集的时候胰酶作用时间太长(我是每空家2ml胰酶,直至细胞全部消化下来)。请问胰酶如果长时间
2013年12月07日发布人:静夜思
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[size=2][color=Black][b]在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结
2013年04月23日发布人:3648755
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求助DMSO的灭菌方法,急用,谢谢[/size],[size=2]
滤器加滤膜过滤除菌,避光保存[/size],[size=2]
无需灭菌,本身它就具有杀菌的作用。你只需要保证你用来吸取及贮存的物品为无菌即可
2014年09月02日发布人:pengke1983
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[color=SlateGray][size=4][font=仿宋_GB2312]求助:pcr产物酶切后电泳不出条带 [转自 丁香园论坛]
我最近做PCR后酶切,出现两个问题求各位帮忙解决
1 PCR产物酶切后,电泳不出条带
2011年09月03日发布人:蛐蛐儿
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,配制后可过滤除菌,也可高温消毒灭菌。[/size],[size=2]
用Annexin V做细胞凋亡检测时,不能用含EDTA的胰酶,否则EDTA会螯合Ca2+,从而影响Annexin V与PS
2015年08月11日发布人:sistis
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[size=4][font=楷体_GB2312][求助]关于酶切
俺也想做酶切。但是说明书上给出的要求是DNA底物为1微克,这真是难为人,谁帮俺定定量呀?
还有说明书上给出的要求限制性内切酶用量为2-4单位,但试剂商提供的酶原
2011年10月07日发布人:mogu
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[size=2][color=Black][b]
检测细胞上清中MMP2和MMP9的活性变化,使用明胶酶谱法检测,明胶浓度0.1%(1mg/ml),浓缩胶5%,90V电泳;分离胶10%,150V电泳。
细胞上清获取:无血清培养24小时
2013年10月07日发布人:Ao7
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][/font][/color][/size],[color=Black][size=4]体系不是问题,若你15微升体系能看见带,切不出来就是切不出来。放大也没用。我的分析可能原因如下:
1,DNA不纯,可考虑纯化一次。
2,双酶切体系有
2011年10月11日发布人:duoduo