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最近看了论坛里有很多纯化方面的大师,小弟目前也遇到了些纯化方面的问题,希望大师们给小弟点意见
我用的蛋白纯化系统是halotag蛋白纯化系统,这套系统好像用的人不多
2013年06月04日发布人:she
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情况如下:
基因工程发酵纯化一种38肽(cP),载体为pet32a,宿主菌为大肠杆菌BL21,目的蛋白为硫氧环蛋白-cP融合蛋白;测序证明碱基序列正确,小量发酵验证融合蛋白大小正确;问题及
2014年01月06日发布人:superboy
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本人有一蛋白,包涵体形式存在,分子量16.7KD,等电点7.6
1.阳离子柱CMFF纯化,将蛋白溶解在9M尿素中,调PH=4.0,BufferA,B,C的PH=4.0,过柱子后,蛋白大部分
2014年01月22日发布人:misswu61
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[size=2][color=Black][font=Impact]最近在用Amylose resin纯化MBP融合蛋白,但每次杂带都挺多的,各位大侠出出招吧!!!
SDS-PAGE电泳上样顺序为:超声上清、超声沉淀、流液、纯化1-5
2013年06月26日发布人:ha111
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小弟前两天做了外源蛋白的表达,我的蛋白是分泌型的,我把发酵培养液在tris缓冲液中透析24小时后,就上了亲和层析柱子,由于我表达的是人VEGF,和肝素有亲和力,所以选用肝素
2014年05月16日发布人:free
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[size=2][color=Black][b]请问一个问题:在镍柱纯化目的蛋白过程中,用咪唑洗脱蛋白,那么咪唑就会与镍离子结合,那用什么方法去除咪唑呢?[/b][/color][/size],[size=2][color=Black
2013年04月11日发布人:ffaa
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[size=2][color=Black]最近在表达一个蛋白,N端加了GST标签,C端加了HIS标签,分子量90kd左右,先使用GST,然后使用HIS亲和层析,但总有一条50kd左右的杂带无法去除,请大家分析一下,谢谢!
第一张图
2013年10月06日发布人:bs4665
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帮忙!![/font][/color][/size],[size=2][color=Black][font=Impact]
下面一段文字转自某人的一篇文章“常见重组蛋白的纯化”,你看看吧,应该收益匪浅。
杂带多:GST融合蛋白的表达系统很容易
2023年08月30日发布人:3N4G
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宿主菌为BL21(DE3) 表达载体为pET30a(+) N端HisTag
目的融合蛋白20kDa左右,是含7个半胱氨酸残基的TGFbeta超家族的因子nodal(二聚体有活性)
用的是
2013年12月16日发布人:jiushikeshui371
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[size=2][color=Black][font=黑体]本贴主要针对论坛中在以下领域从事研究的有经验的虫友们进行有奖经验收集:
从事天然药物化学、中药化学、合成药物化学、生药学等相关专业,凡是涉及到提取-萃取-分离纯化-结构鉴定任何
2014年10月30日发布人:园丁##