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有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排
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本方法以L-赖氨酸和L-蛋氨酸为例,对饲料等样品中十几种氨基酸的测定方法做一简要介绍。一、方法原理对氨基酸进行柱前衍生后,在254nm波长下,以保留时间定性,采用外标法分析时,需做标准曲线,无需加入正亮氨酸内标物。二、所需仪器和试剂仪器
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多氨基(碱性氨基酸)和多羧基(酸性氨基酸)氨基酸的解离解离原则:先解离α-COOH,随后其他-COOH;然后解离α-NH3+,随后其他-NH2。总之羧基解离度大于氨基,α-C上基团大于非α-C上同一基团的解离度。等电点的计算:首先写出解离方程,两性离子左右两端的表观解离常数的对数的算术平均值。一般pI值等于两个相近pK值之和的一半。如天冬氨酸、赖氨酸。
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为10.0 ± 0.2,加1.50 ml 4-氨基安替比林溶液,混匀,再加1.5 ml铁氰化钾溶液,充分混匀后,放置10 min。准确加入10.0 ml三氯甲烷,加塞,剧烈振摇2 min,静置分层。用干脱脂棉或滤纸筒拭干分液漏斗颈管内壁,于
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± 0.2,加4-氨基安替比林溶液1.0 ml,混匀。再加1.0 ml铁氰化钾溶液,充分混匀,放置10 min后立即于510 nm波长,用光程为20 mm比色皿,以水为参比,测量吸光度。经空白校正后,绘制吸光度对苯酚含量(mg)的校准曲线
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试剂和器材
一、试剂及材料
(1)实验动物—家兔 (2)1/15M磷酸缓冲液(PH=7.4)
(3)1%谷氨酸溶液(用KOH中和至中性)
(4)1%丙酮酸溶液(用KOH中和至中性)
(5)0.1%碳酸氢钾溶液 (6
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硫酸盐十分常见,且在其固体盐中出现的这个离子常常携带阴离子结晶水,这是由于水分子通过氢键和上面的氧原子相连。(1)农业用途硫酸钾是常见的钾肥,硫酸铵是常见的铵态氮肥,注意不要与碱性质一起施用,否则会放出氨气,降低肥效。硫酸铜溶液为蓝色
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、缩醛、丙酮、苯、乙酸乙酯、乙酸甲酯等。闪点在25℃以下的有丁酮、甲苯、甲醇、乙醇、异丙醇、二甲苯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、三聚甲醛、吡啶等。这类试剂要求单独存放于阴凉通风处,理想存放温度为一4~4℃。闪点在25℃以下的试剂,存放最高室温不得超过
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倾向于生成对位一取代产物——4-羟基二苯甲烷,较低温时倾向于生成2,4,6-三苄基苯酚。氯化苄与苯在氯化铝加热催化下发生傅-克烷基化反应,但由于苯,氯化苄,还有第一步反应产物二苯甲烷的苯环活性相近,都可以发生该反应,会导致不可控副反应多且严重,反应产物复杂。
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本试验应使用无酚蒸馏水配制试剂。①吸收液,碳酸钠溶液(pH为10±0.2):取500ml水,旧酸度计测量溶液pH值,在搅拌下逐渐加入碳酸钠固体,至溶液pH值为10±0.2。②1.0%(m/V)4-氨基安替比林溶液:在冰箱内可保存两周