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[size=3][font=仿宋_GB2312][讨论帖]手性异构体的分析方法验证(专属性试验)
按照[H]GPH8-1 手性药物质量控制研究技术指导原则的分析方法的验证:方法的验证应参照分析方法验证的技术指导原则,对于光学纯度
2011年11月24日发布人:bluelake
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[size=2][color=Black]请教各位大侠,我诱导了200ml菌液,加入多种酶、破菌后,低浓度尿素洗涤,用8M尿素溶解包涵体,完全悬浮沉淀后,液体呈淡红褐色,4度过夜,离心后仍有很多沉淀。这沉淀吹打时有些粘稠,红褐色。电泳结果
2014年02月20日发布人:49888
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[size=2][color=Black][font=黑体]我将菌体破碎之后,用各种缓冲液洗涤杂蛋白,之后用8M尿素融解包涵体,但是最后离心所得的上清中蛋白浓度总不是很高。
用尿素融解包涵体之后,会发现离心管里有透明的黏糊糊的东西,我用
2014年03月03日发布人:@STAR@
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Marker吗,据说价格不低,其他确定分子量方法还有吗?非还原电泳与之有不同吗?
小的在此叩谢了!![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
把你现在纯化的蛋白跑个非还原SDS-PAGE与之前同时含有单体和二聚体的样品一起跑,看看跟那条条带相近应该就知道是什么形式了呵!或者把纯化出来的蛋白打个质谱,这样得出的分子量
2014年03月03日发布人:89tongzijun
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有机酸。
请问54号色谱柱是什么柱子?,强酸性还是强极性呀?强酸性的样品做多了可能会改变固定相的极性哦。
如果是强极性的样品也可以在弱极性柱上分析。分析结果的准确性要标化的吧,楼主,不稀释吗?稀释后问题不大,最好说下是什么酸?目标物
2010年07月24日发布人:玲珑
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[size=2][color=Black][font=黑体]
师兄师姐好,750bp长度的PCR产物,扩增出来目的条带还可以,但是100bp下面有模糊的引物二聚体,有时甚至和目的条带一样清晰,之前不以为然,测序后发现不理想,请问如何消除
2016年04月04日发布人:tie8
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[size=2][color=Black][font=黑体]我的包含体就是溶解不了,8M尿素和6M盐酸胍都溶解不了,所以我想是不是要把盐酸胍的浓度调到8M呢?
还有就是,如果用盐酸胍溶解了,是否可以直接过NI-IDA柱呢?binging
2014年03月27日发布人:boom
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],[size=2][color=Black]最好告诉复性液的情况,可能更便于分析,目前两种可能都有;复性不好,透析液不利于目标蛋白的溶解。[/color][/size],[size=2][color=Black]包含体复性三大原则:
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2013年10月31日发布人:boom
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[size=2][color=Black]
目的基因999bp,40度下1mM IPTG诱导4h,收集1mL菌液加入100μL SDS-PAGE的loading buffer,变性5min,离心,上清20μL 上样。电泳结果如图。目的
2014年07月02日发布人:orangecake
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、Tris-HCL+Triton X-100+EDTA或单独0.1%Triton X-100[/color][/size],[size=2][color=Black]
反复冻融,-20/37也可以阿,谁说一定要-80C。
渗透压破碎就行了,用不着碱。[/color
2012年08月31日发布人:8princess8