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一、氨基酸的分离和检测氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪.随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性.但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高
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各种氨基酸可按照特定的化学反应进行降解。多数必需氨基酸主要在肝内降解,异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸则主要在肌肉以及肾、脑中降解。氨基酸降解后的产物,一方面可以通过糖异生过程,生成葡萄糖,如葡萄糖一丙氨酸循环的代谢途径,就是有效的氨基酸糖异生
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,如Ag+、Hg2+,就能与巯基反应,生成硫醇盐,导致含巯基的酶失活。 5. 以下反应常用于氨基酸的检验: l酪氨酸、组氨酸能与重氮化合物反应(Pauly反应),可用于定性、定量测定。组氨酸生成棕红色的化合物,酪氨酸为桔黄色。 l精氨酸在
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解离原则:先解离α-COOH,随后其他-COOH;然后解离α-NH3+,随后其他-NH2。总之羧基解离度大于氨基,α-C上基团大于非α-C上同一基团的解离度。等电点的计算:首先写出解离方程,两性离子左右两端的表观解离常数的对数的算术平均值。一般pI值等于两个相近pK值之和的一半。如天冬氨酸、赖氨酸。
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:一类是利用蛋白的共性,即含氮量、肽键和折射率等测定蛋白质含量;另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一,在国内外应用
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定量稀释制成每1mL中含5µg的溶液。 对照品溶液:精密量取头孢氨苄对照品、双氢苯甘氨酸对照品和7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸对照品各适量,置同一量瓶中,先加7.3%盐酸溶液4mL,超声使溶解,再用对照溶液定量稀释制成每1mL中含上述3种杂质
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氨基酸的酸碱滴定曲线以甘氨酸为例:摩尔甘氨酸溶于水时,溶液pH为5.97,分别用标准NaOH和HCl滴定,以溶液pH值为纵坐标,加入HCl和NaOH的摩尔数为横坐标作图,得到滴定曲线。该曲线一个十分重要的特点就是在pH=2.34和pH=9.60处有两个拐点,分别为其pK1和pK2。
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氨基酸结构和分类 (一)基本氨基酸 组成蛋白质的20种氨基酸称为基本氨基酸。它们中除脯氨酸外都是α-氨基酸,即在α-碳原子上有一个氨基。基本氨基酸都符合通式,都有单字母和三字母缩写符号。 按照氨基酸的侧链结构,可分为三类:脂肪族氨基酸
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氨基酸的测定——电位滴定法1、原理氨基酸具有酸性基团—COOH和碱性基团—NH2,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池,用氢氧化钠标准溶液滴定,依据酸度计
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氨基酸的等电点:氨基酸的带电状况取决于所处环境的pH值,改变pH值可以使氨基酸带正电荷或负电荷,也可使它处于正负电荷数相等,即净电荷为零的两性离子状态。使氨基酸所带正负电荷数相等即净电荷为零时的溶液pH值称为该氨基酸的等电点。