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我最近做GST融合蛋白。质粒为PGEX-4T-2,表达菌株为Rosetta gami 2.做了24度30度诱导发现形成包涵体,可溶蛋白不多。请问各位高手,如何来避免形成包涵体啊?谢谢大家
2014年01月15日发布人:芙蓉宫主
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通过培养和诱导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)。
基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon
2015年03月16日发布人:coolcool
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如题![/font][/size],[size=2]
厂商一般都有比较吧
不过一般都是自己的比别人的好或者差不多
如需要可站短[/size],[size=2]谢谢!本来是用GE的,老板拿了其他
2015年09月08日发布人:ha111
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我用BL21表达GST融合蛋白,形成了包涵体,可用8M尿素溶解,但请问溶解后可直接用GST beads结合纯化吗?[/color][/size],[quote]原帖由 [i]Darcy[/i
2013年11月09日发布人:Darcy
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本人新手,拟采用GST pull down 作蛋白质的相互作用。大致思路:已采用免疫共沉淀确定A与B存在相互作用,且获得了A&B的真核表达质粒。现将A分为七个结构域,进一步确定A与B的互作域
2014年06月10日发布人:tie8
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买回来的Glutathione Sepharose 4B被收到了冰箱得冷冻柜,发现后拿出融化,大概已经冻了两天了.后来做GST融合蛋白纯化时效果不太好了,不知道是不是因为冻过了,有没有高手
2014年07月05日发布人:鹅鹅鹅
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我表达一个GST融合蛋白,用的是载体 pGEX-6P-1, 我的目的蛋白为约11KD,但是诱导表达后竟然蛋白在沉淀中,形成包含体。后来我又在低温 16度诱导了3.5 hr, 还是形成包含体
2014年05月15日发布人:flower@@
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大家好,现在发现很多企业或多或少都会使用一些仪器设备分析样品,而且很多分析方法是由厂商提供的。我想说的是,这样的方法可靠吗?,看你要不要过认证咯,过认证这种方法,评审不承认的,如果不过认证,应该问题不大,经过认证的方法还是可靠的,看看方法
2015年10月07日发布人:longquan
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请问用凝血酶thrombin酶切gst蛋白时,采用bovine小牛规格的酶可以吗?纯度为77%,但稀释跑胶发现有多条杂带。是否有必要用专门的restriction级别的,谢谢
另外,酶切时
2014年06月28日发布人:newway
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有广告嫌疑,不过确实是很好很全面的技术文献!分享给大家,英文的。
附件:
glass disks and solutions by fusion.pdf,好东西,感谢分享,还有个汉译版的前阵子也有网友上传过,再把中文的提供给大家。这样比较全面了。
附件:
熔融制片中的玻璃片和熔融液.pdf
2016年02月24日发布人:tomm