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[size=2][color=Black][font=Impact]
用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年07月22日发布人:shanzhapia696
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[size=2][color=Black]我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654
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[size=2][color=Black][font=黑体]
各位好,我最近在做一个his-tag蛋白纯化,37度诱导表达,跑SDS-PAGE电泳,看到目的蛋白表达了。纯化用的是NOVAGEN的Ni-NTA his-bind resin
2013年10月27日发布人:鹿奔奔
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[size=2][color=Sienna]
我现在用Ni柱纯化his蛋白,想做柱上复性,遇到的问题如下。
收集各步洗涤的溶液,检测结果发现在蛋白加到柱子上以后就很多蛋白没有结合就流了下来,第一次洗涤溶液中蛋白量也不少,之后的几次
2013年06月08日发布人:hulu呼噜
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[size=2][color=Black][b]我做过不少磷酸化蛋白的Western blot,之前在免疫学技术讨论版发过贴子:
[url]http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id
2013年05月06日发布人:箭头儿
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[size=2][color=Black][font=Impact]
用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年11月12日发布人:pou
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, 1988
4. New Nucleic Acid Techniques.
Edited by Walker, John M., 1988
5. Animal Cell Culture.
Edited by Walker, John
2014年05月15日发布人:zhihui小新
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我的重组蛋白带His标签,挂柱子前的cell-free体系是有活性。
柱子用含20mM 咪唑的binding buffer平衡好,样品挂柱子后不经任何处理,直接收集的馏分就已经没有活性了。
更不要说含80mM,250mM咪唑的
2015年10月27日发布人:无怨无悔
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[size=2][color=Black]前面一直做双向,第一次尝试做了一下label-free的分析,关于蛋白质鉴定的问题甚是不解。在此写下疑惑,望诸位高手不吝赐教,感激不尽!
我做的是水产动物,自然不是模式生物。LC-MS/MS的
2013年10月25日发布人:uaubc
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[size=2][color=Black]最近在表达一个蛋白,N端加了GST标签,C端加了HIS标签,分子量90kd左右,先使用GST,然后使用HIS亲和层析,但总有一条50kd左右的杂带无法去除,请大家分析一下,谢谢!
第一张图
2013年10月06日发布人:bs4665