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[size=2][color=Black][font=黑体]做了快俩月的酶切了,要崩溃了。泳道1是酶切前的GST融合蛋白,泳道2是酶切后的,只剩下GST了,我的目的蛋白哪里去了,应该在marker从下往上数第二和第三条带之间。不断的调整酶
2013年05月31日发布人:nvdabing
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[size=2][color=Black]
bio-rad操作手册上建议每ml裂解液加150-300 u内切酶。
问题来了:细胞裂解液为高浓度的尿素,以及硫脲、DTT等,这些对核酸内切酶的活性没有影响么?我个人认为内切酶作为一个蛋白质
2014年03月18日发布人:bgf5
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汁浸提率的影响时,底物,调节PH,和加酶他们的顺序是什么?谢谢大家,用缓冲溶液将底物体系的pH调整到目标pH之后,添加果胶酶制剂的稀释溶液,考虑pH值对酶解的影响,应该在酶解前先调pH;第二个问题,我觉得排序影响不大。,加酶前调Ph。楼主
2023年08月10日发布人:星星……
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[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312]甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法) [转自 丁香园论坛]
甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家
2011年09月02日发布人:finger
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。[/size],[size=2]W的意思是WEEK。
意思是一个星期
如果要表示一天的话,人家会写1d[/size],[size=2]同理,
如果两个小时内,人家就会写2h。
如果是一个月,就会写1m
一年会写1y[/size
2015年03月28日发布人:盼盼
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,一抗 0.5%脱脂牛奶(TBST配) 1: 1000 (推荐浓度为1:2000)稀释 4°摇床过夜
TBST 10min x2,TBS10min x1
7,二抗 0.5%脱脂牛奶(TBST配) 1: 2000 室温1
2013年05月11日发布人:flower@@
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][/font][/color][/size],[color=Black][size=4]体系不是问题,若你15微升体系能看见带,切不出来就是切不出来。放大也没用。我的分析可能原因如下:
1,DNA不纯,可考虑纯化一次。
2,双酶切体系有
2011年10月11日发布人:duoduo
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[size=2][color=Black]各位做GSTtag酶切的时候,有没有遇到过这样的问题,电泳显示2个蛋白带,但过GST柱子两个蛋白一起被抓了出来
如题
见图
Y=原液
CT=流穿
纯化1,2=GST柱子
2013年11月10日发布人:abc816
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[color=Black][font=楷体_GB2312][b][size=4][精华]】RealTimePCR问题专贴--请先看P1的问题汇总
开个帖子,有定量PCR相关的问题可以提问,如果有类似/雷同的问题我会整理在一起
2011年10月16日发布人:潇湘子
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,质粒与原先的质粒差不多大小;但是酶切插入片段检测时,并没有看到插入片段,甚至连载体片段也没有,整个电泳条带一片空白,什么东西也没有。这样已经好多次了。换别人做的感受态也是一样的结果。不可能是DNA酶的污染,因为我提质粒,酶切所用的东西别的
2014年05月15日发布人:锤子