-
[size=2][color=Black][font=黑体]
我用pGEX4T1融合GST表达我的蛋白,再用beads纯化。结果显示在纯化前,有我的目标蛋白,但是纯化后,仅在26KD附近有一条带,和GST大小差不多。请问高手们这是
2013年11月18日发布人:lorri
-
[size=2][color=Black]
融合蛋白表达的不是很好,经sarkosyl处理以后是可溶的,用上清作纯化,做了两次什么都没洗脱出来.填料应该是没问题的,因为用来做空载体GST的纯化,洗脱出大量的GST.最近又用融合蛋白
2014年07月04日发布人:qiangren789
-
[size=2][color=Black]求教各位大侠:我表达的蛋白带有GST标签,但是是以包涵体形式存在,因为要用有活性的蛋白做后续实验,所以我选择用8M尿素溶解包涵体,然后又梯度复性,但是复性后的蛋白怎么也挂不上GSTFF柱,因为
2013年10月11日发布人:静夜思
-
[size=2][color=Black]最近在表达一个蛋白,N端加了GST标签,C端加了HIS标签,分子量90kd左右,先使用GST,然后使用HIS亲和层析,但总有一条50kd左右的杂带无法去除,请大家分析一下,谢谢!
第一张图
2013年10月06日发布人:bs4665
-
[size=2][color=Black]
我现在在纯化GST重组蛋白(表达是费了一个月的时间,好不容易搞定了,汗),遇到一个问题,请大家指教!
我的重组蛋白是不可溶的,加上GST为66KD,我是先把它挂上 sepharose 4B
2014年05月24日发布人:utt0989
-
,表达时间3小时、7小时,跑胶做western blotting,结果发现我的载体只表达出GST标签蛋白[/font][/color][/size],[size=2][color=Black][font=Impact]
我的western
2013年12月20日发布人:rxcc33
-
[size=2][color=Black]
大家好!我最近在纯化一种带GST标签的蛋白,诱导条件摸索的过程中发现它的包涵体的量很大,上清中有少量的蛋白。所以我就将包涵体用6M的尿素溶解后,复性,透析,过GST柱,结果发现:
1 我
2013年08月20日发布人:dreaming
-
[size=2][color=Black]
RT。
图中上清里有融合蛋白表达,但在纯化时跟GST磁珠不结合,请高手指教。
蛋白分子量未100kd左右
自左向右为:Marker,未诱导,诱导,未诱导,诱导[/color][/size
2014年03月13日发布人:kewanqi2011
-
[size=2][color=Black][font=黑体]大家好!我最近在纯化一种带GST标签的蛋白,诱导条件摸索的过程中发现它的包涵体的量很大,上清中有少量的蛋白。所以我就将包涵体用6M的尿素溶解后,复性,透析,过GST柱,结果发现
2013年12月06日发布人:nvdabing
-
[size=2][color=Black]
小弟最近在做GST融合蛋白的纯化,可一直没有纯化出大量的融合蛋白,倒是仅是GST蛋白时能被大量提出,GST融合蛋白和GST是一起诱导的啊,为什么差别这么大呢?望各位大侠多多指教,万分感谢
2013年12月19日发布人:dmg