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最近在做蛋白质表达工作,我首先构建的的载体PET-30A-WF(我的基因),在克隆菌TOP上做转化,提质粒测序,正确后转到BL21中,当然也PCR,酶切,测序鉴定了,诱导表达蛋白,我采取了梯度
2014年03月17日发布人:tudou85
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转染带有目的基因的EGFP-N1载体后,观察不到荧光,转染应该没问题。质粒浓度纯度都符合要求,且测序正确,无移码突变。不知道问题出现在什么地方,我于转染24,48小时后观察
2019年11月08日发布人:bananapeople
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有谁用过invitrogen的慢病毒载体?好用吗?[/color][/size],[size=2][color=Black]
我目前正在用,效果还未知,以后我们可以一起交流经验
2014年03月07日发布人:idoww
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,怎么会这样?我的载体是双酶切的,怎么会成了空质粒了呢???请大家赶紧帮帮我吧·!!!!![/color][/size],[color=Black][size=2]
首先查一下你的引物在载体中有没有非特异性扩增,其次建议你用连接产物直接转化
2013年11月08日发布人:韩梅梅
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小弟现在做一个膜蛋白的vwestern,分子量为50多,之前用RIPA的裂解液,还可以看到目的条带,但是很淡,为了更好的效果,小弟又专门订了Pierce膜蛋白提取试剂盒,结果很奇怪的就是
2013年04月27日发布人:superboy
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[size=4][color=Purple][b]使用胶回收试剂盒回收PCR产物损失怎么老是很严重呢? [转载]
我为了将PCR产物送测序,先将产物用生工的胶回收试剂盒回收,电泳时明明条带非常清晰明亮,但是回收回来好象就没有什么
2011年09月16日发布人:ha111
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,怎么会这样?我的载体是双酶切的,怎么会成了空质粒了呢???请大家赶紧帮帮我吧·![/color][/size],[size=2][color=Black]
首先查一下你的引物在载体中有没有非特异性扩增,其次建议你用连接产物直接转化BL21
2013年07月02日发布人:glass
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[size=2]请教请问胶回收纯化试剂盒和pcr纯化试剂盒有什么区别?我现在有胶回收试剂盒,能不能不做切胶回收那一步,而是直接用PCR产物来纯化??[/size],[size=2]一般都可以,没问题,比如MN的盒子就都
2015年04月02日发布人:mimili_901
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我用的是Pet30a,这个载体的识别位点ATG是NdeI的后半段,我的基因在多克隆位点引入时有很好的表达,后来,我想去掉里面的标签,诱变掉了我插入的多克隆位点之前所有多余氨基酸,包括NdeI
2014年04月05日发布人:zranqi_1
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[size=2]上海张江,求 pBudCE4.1 载体及GS筛选表达载体(如lonza pee14.1载体),可以各类tag的原核载体交换或以叮当酬谢。谢谢[/size],[size=2]请教一个问题,我听说GS系统是有专利保护的,那么
2014年08月09日发布人:ladyhuahua