-
1,破细胞,高速离心收上清收集上清(同时平衡好柱子);2,既然你是His-tag,用Ni-NTA之类的柱子,两次上柱,buffer平衡;3,低浓度咪唑(5mM)洗5-10柱体积,以洗去杂蛋白;4,过梯度咪唑(10-500MM),用紫外
-
甲苯磺酸、咪唑化合物以及三氟化硼乙醚络合物等,这在生产中很实用。邻苯二甲酰化法快速测定羟值:此法适用于测定聚醚多元醇羟基(伯、仲羟基)和含有部分仲羟基的聚酯多元醉。在测定聚醚多元醇羟基时,采样量按(561/估计羟值)的量,参考采取。反应如下
-
含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于巯嘌呤50mg),置100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液50ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,用0.1moL盐酸
-
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于甲氧苄啶50mg),置250ml量瓶中,加稀醋酸约5σ0ml,充分振摇使甲氧苄啶溶解,用稀醋酸稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液
-
尿素在纯化包涵体时用,一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中,纯化可溶性蛋白时不用加尿素。洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来,如果想让蛋白纯度高的话,可以用不同的咪唑浓度
-
尿素在纯化包涵体时用,一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中,纯化可溶性蛋白时不用加尿素。洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来,如果想让蛋白纯度高的话,可以用不同的咪唑浓度
-
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液精密量取本品1ml,置25ml量瓶中,用稀醋酸稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置100m量瓶中,用稀醋酸稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取甲氧苄啶对照品适量,精密称定,加稀醋酸溶解并定量稀释制成每1ml中约含20g的溶液。测定法取供试品溶液与对照品溶液,在271nm的波长处分别测定吸光度,计算。
-
移至5ml量瓶内,加甲醇至刻度,摇匀,即得。4.测定法精密量取对照溶液10μ1、20μl,供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定,以外标两点法对数方程计算,即得。本品按干燥品计算,含黄芪甲苷(C41H68O14)不得少于0.040%。
-
酸度取本品0.50g,加水25m1溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~7.0有关物质照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加乙酸乙酯溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液对照溶液(1)精密量取供试品
-
鉴别(1)取本品2片,研细,加热乙醇20ml,研磨1分钟,滤过;滤液置水浴上蒸干,残渣加水20ml溶解,滤过,取滤液1ml,照甲巯咪唑项下的鉴别(1)项试验,显相同的反应。(2)取含量测定项下的供试品溶液,照紫外可见分光光度法(通则