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[size=2][color=Black]好像大家都是过Ni柱纯化目的蛋白的
要是不需大量目的蛋白,可不可以把裂解液与Ni琼脂糖混合在一起,不在柱子里反应啊?一定时间后再洗脱 有没有战友这样做过呀?
因为没有过柱的设备啊 唉[/color][/size],[size=2][color=Black
2014年02月10日发布人:zhenxin
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我原核表达的蛋白用QIAGEN公司的Ni-NTA Superflow进行纯化接着跑SDS-PAGE,我的目标蛋白是110KDA,但在50KDA时还有一条很粗的条带,在其地方也有一些杂带但不是很明显,我也用不同浓度的咪唑进行洗脱了
2013年07月03日发布人:mamamiya
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不过是哪个效果还差得很远,his纯化应该能达到很高的纯度才对
祝好运![/color][/size],[quote]原帖由 [i]NBA[/i] 于 2014-2-8 11:22 发表 [url=http
2014年02月08日发布人:kulee
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[size=2][color=Black]我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654
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各位战友,我最近纯化一蛋白,先是用镍柱亲和纯化,然后用凝血酶切除his标签。切除是在室温过夜进行的,将酶切混合物加到透析袋,以去除切掉的his tag以及elution过程中的大量咪唑。透析液
2014年02月03日发布人:969
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现做一固体制剂,准备整理CTD资料,有三个规格,且三个规格的各组分处方量不相同,这种情况,资料整理到一套中,还是三个规格分开整理啊?感觉两种情况整理起来都显得比较乱,审评中心针对这样情况,是怎么建议的呢?请有经验的同仁解答。,如果API和
2014年02月06日发布人:a456
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.[/color][/size],[size=2][color=Black]
刚接触做蛋白实验,很多都不懂-_____-
谢谢回复。
我对用抗体检测还是不明白,针对his-tag的蛋白,需要买一个his的一抗,还有二抗,还有显色液,对吗
2014年05月20日发布人:caihong
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[size=2][font=黑体][color=DarkRed]标签:ac ir sta pl 晶体[/color]
各位战友好!
因实验之用向本市一家机构借用PIKE Miracle ATR 实验仪,因实验操作不当,不慎将其内光学配件ZnSe晶体损坏。
因各种原因,该仪器
2015年01月31日发布人:49888
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[size=2[color=DarkRed][font=黑体]]标签:ac ir sta pl 晶体[/font][/color]
各位战友好!
因实验之用向本市一家机构借用PIKE Miracle ATR 实验仪,因实验操作不当,不慎将其内光学配件ZnSe晶体损坏。
因
2014年09月09日发布人:蓝蜗牛
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用anti-his antibody WB检测,表观分子量40kDa的蛋白是目的蛋白。为什么这个表达的蛋白出现在40kDa处?我很想把这个问题搞清楚,但是老板说his是碱性氨基酸,很容易在电泳的时候出现异常,不必浪费时间,还有别的工作等着做。
我
2014年06月05日发布人:damingxia0904