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[size=2][color=Black][font=Impact]
用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年07月22日发布人:shanzhapia696
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,最好4度.[/color][/size],我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654
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[size=2][color=Black][font=黑体]
各位好,我最近在做一个his-tag蛋白纯化,37度诱导表达,跑SDS-PAGE电泳,看到目的蛋白表达了。纯化用的是NOVAGEN的Ni-NTA his-bind resin
2013年10月27日发布人:鹿奔奔
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[size=2][color=Sienna]
我现在用Ni柱纯化his蛋白,想做柱上复性,遇到的问题如下。
收集各步洗涤的溶液,检测结果发现在蛋白加到柱子上以后就很多蛋白没有结合就流了下来,第一次洗涤溶液中蛋白量也不少,之后的几次
2013年06月08日发布人:hulu呼噜
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[size=2][color=Black][b]我做过不少磷酸化蛋白的Western blot,之前在免疫学技术讨论版发过贴子:
[url]http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id
2013年05月06日发布人:箭头儿
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[size=2][color=Black][font=Impact]
用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年11月12日发布人:pou
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=Black]样品盐浓度太高.....电泳时发热,没放到4度下跑.....[/color][/size],[quote]原帖由 [i]fqswdzd[/i] 于 2013-11-16 10:51 发表 [url=http
2013年11月16日发布人:fqswdzd
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[size=2][color=Black]最近在表达一个蛋白,N端加了GST标签,C端加了HIS标签,分子量90kd左右,先使用GST,然后使用HIS亲和层析,但总有一条50kd左右的杂带无法去除,请大家分析一下,谢谢!
第一张图
2013年10月06日发布人:bs4665
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[size=2][color=Black]纯化his-tag蛋白的镍柱可以永久性再生吗?如果不能够,大概能够用多少次呢?
几丁质层析柱大家都是用5次就重新换填料吗?[/color][/size],[size=2][color
2013年10月29日发布人:xiaoxiaoniao
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[size=2][color=Black]
各位童鞋你们好,请教你们一个问题:我在用His-tag磁珠试剂盒纯化带有His标签的蛋白,为什么蛋白老是结合不到磁珠上去?以至于纯化效率极低。有人说是pH问题,变性洗净液的pH为8.0,用之
2013年06月05日发布人:wsll