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惨了,我合成了11对引物,大概有400bp,10OD,要1000多,其实不要10OD的,2OD就够了,但是看丁香园有人说价格都是一样,不管是2还是10OD,
现在我这生工代理要2.8元/BP,我该怎么半啊
我以为是
2015年12月04日发布人:969
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!8ml左右出来的是高聚,后来试过其他的方法!如添加DTT,10%甘油,改变NaCl浓度,改变pH值等都没有效,所以来问问大家有碰到过这个高聚的问题吗?有什么好的方法吗?推荐下,谢谢!! [/color][/size],[size=2
2013年12月16日发布人:viviwang1987
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的正向引物,反向引物也是试剂盒配的通用引物。内参选用U6,现在的问题是我的U6的引物应该只加正向引物然后反向用通用的引物吗?
实验的过程中发现待测的miRNA曲线都有出来,我的U6加特异性正向引物和通用反向引物,曲线跑不出来,当我改成U6
2015年11月07日发布人:dotaaa
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我们也有这种情况,我们就在跑琼脂糖电泳的时候多跑一会,让二聚体的条带尽量跑在下面。不知道能不能满足你的要求。[/size],[size=2]
尝试减少引物量,做个梯度,选取即能保证回收条带亮度,二聚体又最少。[/size
2016年04月04日发布人:tie8
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[size=2]我的引物是75bp的长引物,pcr的时候总是出现很亮的引物二聚体,比目的条带还亮。我试用过把引物煮沸5分钟迅速冷冻再加样的方法,发现没什么区别,还是很亮。是不是长引物就很难消除引物二聚体啊。求教~~~~[/size
2015年01月14日发布人:jebel
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我使用NI亲和层析可得到比较纯的蛋白单体和二聚体,二聚体大小为60KD,单体30KD,我们的目的蛋白为二聚体。请教分离蛋白单体和二聚体可以从哪些性质入手,采用什么方法(如考虑大小的区别,采用
2014年02月28日发布人:dodoit
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引物Tm值是58度,扩增目的条带217bp,分别在退火温度55度和57度跑PCR,内参条带很清楚,可是没有目的条带,而是引物二聚体,我该怎么办?再提高退火温度还是降低退火温度,请高手指教啊,十万火急!谢谢![/size
2015年11月10日发布人:wiwi
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不佳。:(
总之谢谢各位了,还请不吝赐教。小弟在此谢过先:)(PS:不太喜欢重新设计引物的方法,因为这对引物已经是所能找到的最合适的了)[/size],[size=2]
我们也有这种情况,我们就在跑琼脂糖电泳的时候多跑一会,让二聚体的
2016年03月03日发布人:969
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[color=Black][size=5]只有引物二聚体没有目的条带,换引物还是这样,内参有条带,求助原因啊! [转自 丁香园论坛]
最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,
我的PCR条件是这样的
2011年08月23日发布人:+田田+
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[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312][b]求助:怎么老有引物二聚体 ?[转载]
我做RT_PCR有一段时间了,但是我怎么调Tm直,改变引物(已经设计了两对引物了)可是总有引物二聚体,我要的
2011年09月22日发布人:panda王