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我的重组蛋白带His标签,挂柱子前的cell-free体系是有活性。
柱子用含20mM 咪唑的binding buffer平衡好,样品挂柱子后不经任何处理,直接收集的馏分就已经没有活性了。
更不要说含80mM,250mM咪唑的
2015年10月27日发布人:无怨无悔
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ICP的雾化室,相信大家都不陌生,主要给气溶胶达到等离子体前提供区域,气溶胶微粒快速地去溶、蒸发和原子化,雾化器必须产生小于10 um 直径的雾滴。大于这个直径规格的就当废液从废液管流出,大家是如何理解这个直径规格要求的?,直径规格要求
2015年07月19日发布人:ayanyang
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[size=2][font=黑体]最近要开始试验了,从没养过细胞,这次要用HEK293,没有找到相关的文献,有没有前辈能够指导一二,或者给我点相关的文献啊?非常感谢了。[/font][/size],[size=2]
我们这养过 还算好养
2015年02月23日发布人:october7
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[size=2][color=Black][b]载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上
2023年07月15日发布人:ilovegaga
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[size=2][color=Black][b]
目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
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[size=2][color=Black]
小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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信息,你说的是不是国产的柱子?老板要求买进口的。qiagen和novagen的柱子怎么样?安玛西亚的预装柱卖多少钱呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
qiagen的纯化柱子很多都是针对6His
2013年07月29日发布人:remenb
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[size=2][color=Black]
我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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蛋白的立体结构使His标签没有完全暴露在外,与Ni结合不紧密。[/size],[size=2]嗯,您说的这种情况很可能发生。那是不是也有可能和填料有关呢?[/size],[quote]原帖由 [i]+小生怕怕+[/i] 于
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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求助各位大仙:
最近遇到一个项目,原研胶囊辅料有乳糖,MCC,交联羧甲纤维素钠,MS。粉末直接灌胶囊,其中主药所占百分比不到3%主药在0.01盐酸中略溶,其他三种溶出介质中微溶。主药粒径小,能过120目;其他辅料过100目,乳糖80目。混粉过程采用等量递加,且多次过80目筛混合。感觉混粉静电强
2014年05月08日发布人:momom