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三重四极杆LC质谱仪以正电喷雾电离模式进行质谱检测,根据出峰的保留时间计算m6A的面积。最后根据m6A和总A的比例就能算出m6A在mRNA上整体的甲基化程度。
图2. LC-MS/MS检测RNA甲基化水平示意图
2.比色法
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口服不易吸收,tmax约0.3~3h,PB近100%,原药和代谢物主要经粪便排泄,t1/2约1.5h。匹维溴铵是四价氨的复合物,因而限制了它通过肠粘膜的吸收,口服之后不足10%的剂量进入血液,其中95%-98%与蛋白结合。口服匹维溴铵
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亚甲基蓝是一种常用的染料,常用作生物学实验中DNA电泳的染色剂,通常需要制备1%的亚甲基蓝溶液。制备方法如下:首先,称取0.1g的亚甲基蓝粉末,加入100ml的去离子水中,搅拌均匀,最后用滤纸滤去未溶解的固体颗粒,即得到1%的亚甲基蓝溶液
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DNA去甲基化由DNA去甲基化酶催化。DNA去甲基化是在DNA糖苷酶的作用下脱掉甲基化碱基的反应,等同于被损伤的DNA在糖苷酶及无碱基核酸酶酶切偶联催化下的修复反应。5一甲基胞嘧啶糖基化酶是体内侯选去甲基化酶。此外,甲基化CpG结合蛋白如MBD2等也具有去甲基化酶的活性。
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对于磺胺二甲基嘧啶残留的检测,由于微生物抑制分析方法缺乏灵敏度和特异性,所以高压液相色谱是最常采用的方法,然而 HPLC 方法的缺点是制备样品要耗费大量时间,并且需要昂贵的实验室设备。酶标免疫分析定量测定磺胺二甲基嘧啶残留方法适于做日常
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酚羟基一般在3200-3400左右甲基伸缩振动在2900附近,变形振动在1380,1430附近酯基在1600-1700有极强的吸收,主要是羰基的吸收峰苯环骨架振动在1600,1580附近有吸收紫外吸收峰在237.5nm
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气相色谱法测定甲基对硫磷(甲基E605)的方法灵敏度高,选择性好;盐酸茶乙二胶分光光度法所需设备简单,干扰物较多。一、原理用装有101白色酸洗担体的采样管富集空气中的甲基对硫磷后,加乙酸乙酯解吸,经1.5%OV-17 Shimalite
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DNA甲基化反应分为2种类型。一种是2条链均未甲基化的DNA被甲基化,称为从头甲基化(denovo methylation);另一种是双链DNA的其中一条链已存在甲基化,另一条未甲基化的链被甲基化,这种类型称为保留甲基化(maintenance methylation)。
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检测癌症的生物标志物[1]。一、ctDNA甲基化检测技术方法及研究思路 1.常用检测方法及技术难点:目前,ctDNA甲基化标志物的研究思路已经比较明确。首先,通过芯片或二代测序对肿瘤组织和正常组织进行全基因组范围的甲基化信号扫描,寻找肿瘤特异
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在无水氯化锌存在下,芳烃与甲醛及氯化氢作用,芳烃上的氢原子被氯甲基取代。此反应叫氯甲基化反应。 缩合剂有氯化锌(常用)、氯化铝、氯化锡、硫酸。磷酸或冰醋酸。有时不加缩合剂,盐酸本身即可起缩合剂的作用。 苯、萘、蒽、菲、联苯(三联苯除外)、噻吩、呋喃和它们的衍生物都能发生氯甲基化作用。环上的斥电子基促进反应;吸电子基则阻碍反应的进行。