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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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相关疾病:
感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa
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我用BL21表达GST融合蛋白,形成了包涵体,可用8M尿素溶解,但请问溶解后可直接用GST beads结合纯化吗?[/font][/color][/size],[quote
2014年03月03日发布人:zwsyrt
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请问GST纯化时用高浓度GSSH洗脱会不会影响蛋白活性?100mM/ml的GSSH[/color][/size],[quote]原帖由 [i]nikonun[/i] 于 2013-11-9
2013年11月09日发布人:nikonun
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[size=2]请问,各位培养sf9细胞都使用的什么培养基呢?
有使用TNM-FH培养基培养sf9细胞的吗?
我用这个培养基培养sf9细胞,生长一直不好,细胞增长很少。不知道为什么呢?
请教各位高手![/size],[size=2
2014年12月06日发布人:韩梅梅
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最近做表达,65KD的蛋白,使用pET268载体,准备柱纯化,不知道改选择哪个公司的柱子比较好?第一次接触,还望大家帮忙[/b][/color][/size],[size=2
2013年07月29日发布人:remenb
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现正在做诱导GST融合蛋白的表达,但不知道怎样的条件下表达最好,从一些文献上看到的只是他们做的结果,但我想知道具体怎么摸索最佳条件。怎么知道什么条件是最佳的。[/size][/color
2014年07月07日发布人:mybioon
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细菌包涵体变性裂解方法。主要的目的是纯化蛋白制备单抗。采用的NI是NOVAGEN(NI-NTA HIs bind Resins)产品。步骤完全照说明书进行。 [/color][/size],[size=2][color=Black]这样的
2013年05月13日发布人:如影随形
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我的问题是 因为前段时间细胞状态特别不好,经调整培养条件后,状态好转了。然后做了转染,请问,通过以下图片是否可以判断转染成功,并请高人帮我指出典型的病变细胞。感谢了。因为转染后细胞看起来比较像前些天状态不好的细胞,所以现在不敢轻易下结论了
2012年05月18日发布人:tangxin_80