-
[size=2][color=Black][b]
载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
-
。载体是novagen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是Invitrogen的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。
2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来
2013年04月20日发布人:ukonptp
-
[size=2][color=Black]
我现在在做一个跨膜蛋白的原核表达,载体是PGEX-4T-2,膜蛋白大小是64KD,菌株:BL21,我改变了诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度,但仍然没有表达,测序证实读码框是正确的。 同时空质粒
2013年10月27日发布人:爱老虎游tt
-
[size=2][color=Black]
本人现在用Qiagen公司的pQE-30载体,在M15细胞中表达一种蛋白。加了IPTG诱导后,细菌生长速度都减慢,有的减慢多,有的减慢少,但我就是方法提炼不出我要的蛋白来。
各位大侠,加
2023年08月18日发布人:pulala
-
[size=2][color=Black][b]
请问大家:我现在在表达一个融合蛋白:人的一种膜蛋白与EGFP融合(100kD)。构建在pET-28a(+)上,测序表明完全正确,但是在用IPTG诱导表达时总是失败(IPTG终浓度
2013年11月16日发布人:8黑眼圈8
-
[size=2][color=Black][b]
养了有半年的3T3-L1,最近做诱导分化实验,可总是失败,到分化后第4天,细胞不少死亡,而且周围有大量黑点,还有脱壁情况发生.
这使我对细胞本身产生了怀疑,因为这细胞是别人送给我的
2012年02月18日发布人:loli
-
[size=2][color=Black][font=黑体]
同时表达了几个片段,小的有666bp,大的有2643bp,表达线路是先将片段和载体双酶切连接后转到DH5a里,再从DH5a里提质粒转到表达宿主菌BL21(DE3),几个
2014年05月31日发布人:尘朵朵
-
[size=2]
请问一下细胞不同部位蛋白的提取方法,最近看了一些文献,比如细胞的总蛋白,膜表面蛋白,胞浆蛋白,胞核蛋白,似乎都有不同的提取方法,不知道有没有高手可以告知具体的步骤和大致的原理,非常感谢了。[/size],[size=2
2015年08月10日发布人:shkudo
-
[size=2][color=Black][font=黑体]细胞内布满大量芝麻样颗粒,细胞像被这些颗粒肢解一样,最后只剩下空壳,留着颗粒继续贴着瓶壁!细胞间隙也有大量棒状黑点贴着瓶壁,飘落的死细胞周围也是黑点围绕,并附有丝状物,丝状物上还
2013年01月08日发布人:am10
-
[size=2][color=Black][b]
提供几个细胞原大家参考,还望大家也能提供更多信息
1。 人正常细胞产品及其培养系统
生产商 Cascade Biologics,Inc.
性能介绍 Cascade
2012年07月02日发布人:一叶