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做了两个月的WB,hif-1α还是没有做出来 ,按园子里的前辈方法做了还是没有,也不知道是不是抗体问题,先买了santa cruz ,后又买了novus的,所以在这想请教下哪位老师做出来
2013年06月08日发布人:pou
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蛋白不合适。一般,我转膜actin这样40几kd的蛋白都只是用100V转1h就足够了,你的转膜时间估计有点太久了。至于其他的,选择12-16%的分离胶、用0.22的膜等方法似乎不是首先要考虑的解决办法。我一直都是用10%的分离胶,
2013年07月15日发布人:bluelake
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第一次做Western blot,之前摸索过电泳,转膜的条件,染色后显示转膜比较成功,条带清晰,昨天转膜后用5%脱脂牛奶进行封闭,室温2h,随后洗膜5min*3次,用封闭液稀释一抗1
2013年05月23日发布人:土豆potato
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请教各位,如果用外标法进行全扫描定量,
1.那么需要配的浓度梯度最少要多少个??
2.最后得到的标准曲线的相关系数需要几个9??
3.如果直线没过原点可以吗??
4.内标法是更精确吗?
5.选择离子扫描法进行定量是在什么情况
2011年12月22日发布人:ztjnanning
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封闭过夜,1抗2h,2抗1h,显色
封闭用脱脂乳[/color][/size],[size=2][color=Black]
杂带多的话建议降低一抗浓度,背景很高可以降低二抗的浓度,另外,若ECL显影时荧光很强的话,曝光时间要缩短,几秒钟即可,然后把
2014年03月01日发布人:dotaaa
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、全自动定量浓缩仪、非甲烷总烃专用色谱仪、GC/GCMS(含NPD检测器);HPLC-DAD/PLD.,有离子色谱,就可以测定氟离子了。。。,这个上次一次网络讲坛,华老师回答的。。。和水质109项可以通用。。。,主要是要有人啊,不然就不要买了,像我们,配得很全,却做不好,这个支持。。。。
2016年05月02日发布人:tomm
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方便。,写过这方面的原创[url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20150706/5864514/index_1.shtml[/url],电极法一般,离子色谱法也有,只要有酸度计,买个氟离子电极就行
2015年12月31日发布人:ayanyang
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左右,上样量30ug/孔.我用的是Bio-rad电泳仪,每孔只能上样20uL.
2.转膜15V,35min,Bio-rad半干转
3.5%脱脂牛奶封闭RT,1h;一抗1:1000或1:500RT 2h或4度过夜(倒扣法);二抗1
2014年03月10日发布人:koook5695
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[size=5]2010药典中的检测项目多了很多,要求也提高了很多,这样对制药企业来说是件好事。
但是也带来了相关的问题:我们QC现在没能力做到每次都全检,甚至有些项目是无法检测的(原因是没有设备或者使用了剧毒的试剂)。
我想问
2010年03月29日发布人:blue8eyes
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[size=2]仪器是万通的792,柱子用了4年多了,期间也换了很多次保护柱。现在测氟时重复性差的要命,重复性差前两年就出现了,只是没有现在厉害。开机走基线约1小时,基线平稳后开始进氟标液,4PPM的浓度第一次测得的浓度竟能达到近
2015年07月17日发布人:暗香涌