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每个人在做自己蛋白质组学实验时都有一套对自己可行的实验方法,请大家把自己的实验验方法贴出来。 希望这个是自己正在用的,并且能够得到不错结果的方法,而不是从网页上简单copy下来的。 每个
2013年08月05日发布人:ukonptp
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最近在做WB,用的是膜蛋白,现在想用内参检测下上样量是否相等,可是没找到合适的蛋白做内参。在园子里搜了关于内参的帖子,发现很多人都有我这样的疑惑,而且众说纷纭,没有一个统一的说法
2013年10月27日发布人:尘朵朵
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pet32a到底融合蛋白有多大,前面有his-tag,trx-tag,s-tag共有400多个氨基酸,如果这样算起来应该有40多kd,我的酶切位点前面是bamhi,后面是salI。我的目的条带
2013年06月08日发布人:wu11998866
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大家好,我原来用pET28a载体在BL21(DE3)中表达,蛋白表达量很高,可是包涵体的形式,经过几次复性不成功后,决定更换载体和菌株来进行可溶性表达。结果原来表达
2014年01月15日发布人:mnstyle
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我在做蛋白诱导,载体是pET32a,目前诱导温度是37度,IPTG最大浓度到5mmol/L,但是诱导结果不太理想,主要是量比较小,请问大家,IPTG可不可以加大浓度呢?它的作用原理是什么呢
2023年09月23日发布人:@STAR@
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在GST pulldown实验中,用GST融合蛋白共纯化His融合蛋白,后做WB检测His融合蛋白,用His-tag Antibody作为一抗,用pGEX-4T-1表达的GST蛋白
2014年07月02日发布人:xingyi08
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老板让我做蛋白质结晶和X射线衍射,实验室没人做过,一头雾水!请大家推荐些这方面的文献,或是一些在这方面比较强的牛人!
拜托!感恩不尽![/color][/size],[size=2
2013年11月21日发布人:bluelake
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pET-32a(+),就是在下游引物没有加上终止子,结果表达出来之后,用我买的国产的填料就纯化出来了。我自己的蛋白当初没有在末尾加上终止子,这也是参照我之前一个老师做的才这么做的。那个蛋白也是包涵体表达。我之前自己用填料纯化就是纯化不出来,现在看来是自己的N端的His标签没有显露
2013年10月27日发布人:remonte
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大家好,我在做蛋白纯化,用一个不到1000的分子量物质标记分子量为16万的蛋白,标记后想把未标记上的多余的小分子物质出去,我现在用葡聚糖g-100纯化,可使不可避免会有小分子夹杂着出来
2013年04月17日发布人:rxcc33
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惨了,我合成了11对引物,大概有400bp,10OD,要1000多,其实不要10OD的,2OD就够了,但是看丁香园有人说价格都是一样,不管是2还是10OD,
现在我这生工代理要2.8元/BP,我该怎么半啊
我以为是
2015年12月04日发布人:969