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养了有半年的3T3-L1,最近做诱导分化实验,可总是失败,到分化后第4天,细胞不少死亡,而且周围有大量黑点,还有脱壁情况发生.
这使我对细胞本身产生了怀疑,因为这细胞是别人送给我的
2012年02月18日发布人:loli
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[size=3][color=Black][font=黑体]BCA蛋白已经得出数据,接下来该如何制作标准曲线呢?
谢谢![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
用EXCEL
2013年07月06日发布人:mod=8048
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[size=2][color=Black][b]载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上
2023年07月15日发布人:ilovegaga
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各位战友,我最近纯化一蛋白,先是用镍柱亲和纯化,然后用凝血酶切除his标签。切除是在室温过夜进行的,将酶切混合物加到透析袋,以去除切掉的his tag以及elution过程中的大量咪唑。透析液
2014年02月03日发布人:969
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QIAGEN的价格又降低了,值得用![/color][/size],[size=2][color=Black]谢谢!知不知道qiagen的1ml的预装柱多少钱一根?[/color][/size],[size=2][color=Black]不是所有国产的就不好,原来有个国家重点实验室也用进口的Ni-NTA的也用国产的,后来发觉没差别,现在一
2013年11月16日发布人:如影随形
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用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年11月12日发布人:pou
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载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
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相关疾病:
46XX性发育睾丸疾病
最先开始是用实验室师姐留下来的3t3-l1分化,分化率不高而且细胞容易飘起,后来经过hochest染色才发现细胞早已感染了支原体,所以后来重新购置细胞
我买的是万邦医药的胰岛素
2015年11月14日发布人:fklo83
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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?谢谢![/size],[size=2]我没理解你的穿透是哪种意思,呵呵
1,如果是250mM咪唑的洗脱液将你的蛋白洗脱下来的,这是正常的,250的咪唑就是为了洗脱蛋白
2,在10mM的情况下,蛋白就下来了,如果你的测序是正确的,那可能是
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+