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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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[size=3][color=#0000c0] 从市场定位,销售渠道,售后维修,仪器研发,仪器应用--国产仪器与国外厂商相差不是一点点。市场定位基本上都是低端客户,就是没钱的主,国家食品药品监督基本上很少考虑这些的。现在国外仪器商都
2010年11月27日发布人:dragon5
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蛋白的立体结构使His标签没有完全暴露在外,与Ni结合不紧密。[/size],[size=2]嗯,您说的这种情况很可能发生。那是不是也有可能和填料有关呢?[/size],[quote]原帖由 [i]+小生怕怕+[/i] 于
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
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如题![/font][/size],[size=2]
厂商一般都有比较吧
不过一般都是自己的比别人的好或者差不多
如需要可站短[/size],[size=2]谢谢!本来是用GE的,老板拿了其他
2015年09月08日发布人:ha111
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和novagen的柱子怎么样?安玛西亚的预装柱卖多少钱呀?,[size=2][color=Black]
qiagen的纯化柱子很多都是针对6His纯化的,Ni-NTA申请了专利的,novagen的柱子来自qiagen的授权;而且今年
2013年11月16日发布人:如影随形
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在GST pulldown实验中,用GST融合蛋白共纯化His融合蛋白,后做WB检测His融合蛋白,用His-tag Antibody作为一抗,用pGEX-4T-1表达的GST蛋白
2014年07月02日发布人:xingyi08
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[size=2][color=Black][font=黑体]我表达的蛋白大小在31 kDa左右。在N端有6个His.我在NATIVE 的条件下,用的binding buffer 50mM NaH2PO4, 500 mM NaCl
2013年09月02日发布人:911
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目前热分析市场群雄争霸、百家齐放的状况,虽然进口热分析占据大部分国内热分析市场,然国产分析仪器也逐渐站稳脚跟。
其中:
美国TA、德国耐驰、珀金埃尔默、梅特勒-托利多、塞塔拉姆、日本精工、南京大展、北京恒久、上海精科等知名厂商热分析
2011年02月21日发布人:No.1