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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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惨了,我合成了11对引物,大概有400bp,10OD,要1000多,其实不要10OD的,2OD就够了,但是看丁香园有人说价格都是一样,不管是2还是10OD,
现在我这生工代理要2.8元/BP,我该怎么半啊
我以为是
2015年12月04日发布人:969
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本人从事动脉粥样硬化的相关研究,前期作原代的脐静脉内皮细胞,能养活,但是细胞数量不足以满足试验需要,因此准备找细胞株。
但是ECV-304已经不承认了,请问EA.HY
2012年05月09日发布人:xyw5
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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[size=2][color=Black][font=Impact]我原核表达的蛋白用QIAGEN公司的Ni-NTA Superflow进行纯化接着跑SDS-PAGE,我的目标蛋白是110KDA,但在50KDA时还有一条很粗的条带,在其地方也有一些杂带但不是很明显,我也用不同浓度的咪唑进行洗脱了,但
2013年11月08日发布人:jiushikeshui371
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在GST pulldown实验中,用GST融合蛋白共纯化His融合蛋白,后做WB检测His融合蛋白,用His-tag Antibody作为一抗,用pGEX-4T-1表达的GST蛋白
2014年07月02日发布人:xingyi08
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各位童鞋你们好,请教你们一个问题:我在用His-tag磁珠试剂盒纯化带有His标签的蛋白,为什么蛋白老是结合不到磁珠上去?以至于纯化效率极低。有人说是pH问题,变性洗净液的pH为8.0,用之
2013年06月05日发布人:wsll
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用Protein A 柱纯化抗体过程中,加样时抗体不吸附,出现很高的紫外波峰,所以洗脱时只有很低的波峰,为什么啊?如何解决啊?谢谢![/color][/size],问题提得太。。。太不专业了
2013年12月12日发布人:mamamiya
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成功发布会了,研发上还是比较其他国产厂家有点实力的。主要还是看你检测什么东西,要求高不高,进行合理配置。解决问题还是最关键的。价格作为次考虑。[/size],[size=2]其实最关心的还是色谱柱的稳定性;楼上的凭啥说“研发上还是比较其他国产厂家
2015年11月19日发布人:moonlight
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有没有人看到过free water的概念?
或者这方面的文献。
好像是水中添加了盐之后,free water就会变少了。,就是没有形成结晶水的水,加入盐后,可以形成结晶水,free water就会减少,请问有相关的文献吗?想了解下。,这个属于一般性问题,没有注意到具体的文献
2014年02月05日发布人:jiushi