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[size=2][color=Black][b]载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上
2023年07月15日发布人:ilovegaga
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[size=2][color=Black][b]
目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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信息,你说的是不是国产的柱子?老板要求买进口的。qiagen和novagen的柱子怎么样?安玛西亚的预装柱卖多少钱呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
qiagen的纯化柱子很多都是针对6His
2013年07月29日发布人:remenb
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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蛋白的立体结构使His标签没有完全暴露在外,与Ni结合不紧密。[/size],[size=2]嗯,您说的这种情况很可能发生。那是不是也有可能和填料有关呢?[/size],[quote]原帖由 [i]+小生怕怕+[/i] 于
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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经常在方法中见到3A乙醇,究竟是指什么乙醇呢?无水乙醇吗?还是有特殊规定?,这个概念很头晕,众说纷纭啊!不知道哪个是正确答案。我看看兰氏化学手册上有没有先。,3A乙醇是用3A分子筛提纯,使其不含有乙醚、甲醇、乙醛的高纯度乙醇。,在网上很少能找到这个信息,但是在文件上经常会提到这个,为什么呢?一般什么情况下使用多一点呢?,一般市面有售吗?
2015年01月26日发布人:大学习
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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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[size=2][color=Black][b]
载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
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[url]http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=15595393&sty=1&tpg=1&
2013年12月14日发布人:shanzhapia696